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細胞凋亡檢測
人體內的細胞注定是要死亡的,有些死亡是生理性的,有些死亡則是病理性的,有關細胞死亡過程的研究,已成為生物學、醫(yī)學研究的一個熱點。已知的細胞死亡方式起碼有兩種,即細胞壞死與細胞凋亡(apoptosis)。細胞壞死是早已被認識到的一種細胞死亡方式,而細胞凋亡則是逐漸被認識的一種細胞死亡方式。
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細胞發(fā)生凋亡時,不同區(qū)域內(如細胞膜、細胞漿、線粒體、細胞核等)會發(fā)生不同的生理生化改變。因此,針對不同區(qū)域的細胞凋亡檢測要采用不同的方法。
原理:Annexin Ⅴ是一種分子量為35-36kD的Ca依賴性磷脂結合蛋白,正常細胞中,磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine, PS)只分布在細胞膜脂質雙層的內側,細胞發(fā)生凋亡早期,膜磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內側翻向外側。Annexin V作為一種磷脂結合蛋白,與PS有高度親和力,它通過細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。因此Annexin V是檢測細胞早期凋亡的靈敏指標。該方法通常結合流式細胞術一起使用。
細胞凋亡是生命的基本現象,是維持體內細胞數量動態(tài)平衡的基本措施。在胚胎發(fā)育階段通過細胞凋亡清除多余的和已完成使命的細胞,保證了胚胎的正常發(fā)育;在成年階段通過細胞凋亡清除衰老和病變的細胞,保證了機體的健康。和細胞增殖一樣細胞凋亡也是受基因調控的精確過程。
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