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原代細胞培養(yǎng)的主要注意事項

閱讀：619      發(fā)布時間：2024-10-22
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原代小梁網(wǎng)細胞培養(yǎng)體系是一個為體外生長的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳動物的小梁網(wǎng)細胞設(shè)計的理想的完培方案。本體系是一個基于碳酸氫鹽的緩沖體系，可以在孵育的5%的CO2的氣體環(huán)境下維持一個圍繞pH7.2的酸堿緩沖體系。本體系是一個無菌的液體混合系統(tǒng)，其中包含必須和非必須氨基酸、維生素、激素、生長因子、微量元素和一些其他的有機和無機化合物以及胎牛血清（10%）。本培養(yǎng)體系是基于固定配方配制的液態(tài)培養(yǎng)體系，可以為體外培養(yǎng)的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳動物的小梁網(wǎng)細胞提供一個確定適宜的平衡營養(yǎng)環(huán)境，并且可以選擇性的促進小梁網(wǎng)細胞的擴增。
注意事項：
1、組織塊培養(yǎng)法：
（1）剛接種后，組織塊粘附不牢固，觀察和轉(zhuǎn)移過程中動作要輕，以防引起液體振蕩，使組織塊漂起
（2）培養(yǎng)初期，要注意觀察有無細菌、霉菌污染
（3）原代培養(yǎng)要及時觀察，記錄
（4）過3-5天，需要換液以除去漂浮組織塊和殘留的血細胞，保證原代細胞正常生長
2、消化培養(yǎng)法：某些特殊類型細胞如內(nèi)皮細胞需用特殊的消化手段和步驟進行
3、器官培養(yǎng)和組織塊培養(yǎng)類似
4、懸浮細胞培養(yǎng)法：注意調(diào)整細胞濃度

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