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Kasumi-1 人紅白血病細(xì)胞（STR鑒定）

細(xì)胞特性：

1） 來(lái)源：紅白血病細(xì)胞，

2） 形態(tài)：原粒細(xì)胞，懸浮生長(zhǎng)

3） 含量：>1x10^6 細(xì)胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5）用途：僅供科研使用。

運(yùn)輸和保存：

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

細(xì)胞接收后的注意事項(xiàng)：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完培6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完培來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，20%；GlutaMAX-1谷氨/酰胺 1%，Sodium Pyruvate丙酮酸鈉 1%，雙抗，1%。

 注意事項(xiàng)：
a) 該細(xì)胞復(fù)蘇后成活率較低，會(huì)出現(xiàn)大量死細(xì)胞和死細(xì)胞碎片，培養(yǎng)兩周后有所好轉(zhuǎn)。建議每1-2周對(duì)細(xì)胞進(jìn)行1000rpm, 5mins離心，棄掉上清，加入新鮮wan全培養(yǎng)液，可以去掉部分細(xì)胞碎片和顆粒。培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)死細(xì)胞和細(xì)胞碎片，收到郵寄的活細(xì)胞的用戶若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)物內(nèi)有部分死細(xì)胞和細(xì)胞碎片，此為正?，F(xiàn)象。
b) 細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)有輕微聚團(tuán)，輕輕吹打開(kāi)即可。當(dāng)細(xì)胞密度較大或者培養(yǎng)液變黃時(shí)，需要及時(shí)進(jìn)行半換液或者wan全換液。
c) 該細(xì)胞對(duì)血清質(zhì)量較為敏感，我?guī)旖ㄗh您使用進(jìn)口da品牌優(yōu)質(zhì)血清進(jìn)行培養(yǎng)。
d) 請(qǐng)注意保持細(xì)胞密度在合適的范圍（3x105 ~ 3x10^6 /ml），不能過(guò)稀。

2)培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)  凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完培的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完培重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完培的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

Kasumi-1 人紅白血病細(xì)胞（STR鑒定）

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