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使用液相色譜儀時色譜柱需要注意什么
閱讀:1055 發(fā)布時間:2015-7-6
在使用液相色譜儀分析中色譜柱主要注意以下問題:
1 色譜柱的安裝
色譜柱在使用過程中避免強烈的碰撞和震動。各個廠家生產的色譜柱在接口尺寸上有差異,如果柱頭類型和不銹鋼毛細管接頭兩者類型不匹配,將會產生漏液或者死體積過大的現(xiàn)象。接頭比柱頭深度長,不易擰緊而漏液;接頭比柱頭深度短,柱頭內留有空隙而產生死體積,使譜帶展寬和峰拖尾。
2 色譜柱的平衡
色譜柱平衡指的是用完整的分析程序,運行幾遍測試,等觀察到峰形、保留時間和峰面積穩(wěn)定為止,平衡即完成。另外,在使用緩沖鹽時,應該先使用水過渡后,再將緩沖鹽引入色譜柱,以防止鹽析發(fā)生,從而損壞色譜柱。
3 色譜柱的保存
遵守色譜柱說明書中的保持方式。在實際應用中為了方便也可以如下使用:短期保持用所用的流動相保存為佳,這樣做可以減少下次使用的平衡時間。一般情況下,建議長期用80%甲醇或乙腈來保存反相柱。純有機相保持有zui大限度減少鍵合相水解的作用,但純甲醇(乙腈)又會將已水解而暫時吸附在柱內的鍵合相洗脫出去,使固定相流失進程加快,縮短壽命;另外,純有機相保存時,溶劑易揮發(fā),導致柱床變干,也會容易損壞色譜柱。正相柱一般應保持在所用流動相中。