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液相色譜法檢測(cè)鮑魚(yú)中糖原含量
糖原又稱動(dòng)物淀粉,作為主要能量貯藏形式,鮑魚(yú)中糖原含量較高,并具有調(diào)和浸出物成分的風(fēng)味,增加濃厚感,使之產(chǎn)生*風(fēng)味的作用,鮑魚(yú)的風(fēng)味品質(zhì)與糖原含量呈正相關(guān);當(dāng)受到外界刺激時(shí),鮮活鮑魚(yú)的糖原極易水解,因而糖原含量可作為評(píng)價(jià)鮑魚(yú)鮮度的指標(biāo)。鮑魚(yú)中糖原的定量測(cè)定對(duì)于鮑魚(yú)風(fēng)味品質(zhì)質(zhì)量評(píng)價(jià)體系的建立具有重要意義。
目前關(guān)于鮑魚(yú)中糖原的液相色譜測(cè)定方法尚未見(jiàn)報(bào)道。文獻(xiàn)報(bào)道,,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(010)可修飾糖環(huán)的還原端,使其具有高度紫外吸收,修飾糖能在反相液相色譜柱上能得到很好的分離,并且衍生過(guò)程簡(jiǎn)便快捷,用于單糖測(cè)定非常有效。以液相色譜為基礎(chǔ)的多糖的定量方法具有靈敏度高,準(zhǔn)確性好的特點(diǎn)。
因此,可利用010作為柱前衍生劑,使用液相色譜法,研究了鮑魚(yú)中糖原含量的測(cè)定方法,并對(duì)該方法的準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性和重現(xiàn)性進(jìn)行了驗(yàn)證,此法具有準(zhǔn)確度高、重復(fù)性及穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn),可作為水生動(dòng)物體內(nèi)糖原含量準(zhǔn)確測(cè)定的分析方法。
所需檢測(cè)儀器:
液相色譜儀、二極管陣列檢測(cè)器,超純水系統(tǒng)。
色譜條件
色譜柱:分離柱(4.6×205mm i.d,5µm),柱溫:25℃。
流動(dòng)相A:10%(V/V)乙腈+0.1mol/L乙酸銨,流動(dòng)相B:25%(V/V)乙腈+0.1mol/L乙酸銨。
采用梯度洗脫:0-40min,45%B-100%B,流速:1.0ml/min。
進(jìn)樣量10µL,檢測(cè)波長(zhǎng):245nm。