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檢測(cè)葉片中的葉綠素總量
閱讀：874 發(fā)布時(shí)間：2016-5-17
葉綠素存在于所有植物和部分微生物中,它在光合作用中起著極其重要的作用。在高等植物的組織中依結(jié)構(gòu)的不同,又可分為葉綠素a和葉綠素b。但其基本結(jié)構(gòu)都是鎂結(jié)合的卟啉環(huán)。
當(dāng)前,測(cè)定葉綠素的常規(guī)方法是破胞萃取-紫外分光光度法。該法的不足之處在于,使用諸多的有污染的有機(jī)物作萃取劑,且破胞后其它有色物質(zhì)亦同時(shí)進(jìn)入待測(cè)溶液,嚴(yán)重干擾了光度法的測(cè)定。而采用超聲波輻射,強(qiáng)化鹽酸置換出卟啉環(huán)中的鎂離子,用原子吸收分光光度法測(cè)定鎂,即可推測(cè)出葉片中葉綠素總含量的新方法,對(duì)上述不足之處有較大的改進(jìn)。
檢測(cè)儀器：超聲波發(fā)生器(主頻2450MHz);分光光度計(jì);
測(cè)定條件：原子吸收分光光度計(jì)(空氣-乙炔火焰,波長(zhǎng)Mg285.3nm,狹縫0.65mm,燈電流15.6mA)。
測(cè)定方法：稱取1.000g新鮮植物葉片,放入盛有10mL二次重蒸水的50mL容量瓶中,用低檔超聲波功率提取10s,共兩次,棄去水相;再加入10mL0.5mol/L鹽酸,用中檔超聲波提取10s;用此新鮮鹽酸處理一次樣品即可。用原子吸收分光光度法測(cè)定鎂。本法測(cè)得的是葉綠素a和b中鎂的總和,計(jì)算結(jié)果時(shí)取兩者分子量的平均值(899.3)。