匠心設(shè)計實驗體系，精密配制一系列混合溶液，保持質(zhì)粒 DNA 濃度恒定于 0.5 μg/mL，同時引入梯度變化的聚苯乙烯微塑料濃度，范圍從 0.005 mg/mL 至 5 mg/mL。將溶液輕柔轉(zhuǎn)移至配備高精度溫度控制模塊（精度達 ±0.1°C）與穩(wěn)定振蕩功能（轉(zhuǎn)速波動小于 ±5 rpm）的恒溫振蕩培養(yǎng)箱內(nèi)，設(shè)定溫度為人體生理溫度 37°C，模擬體內(nèi)真實微環(huán)境動態(tài)變化。

沿著精細規(guī)劃的時間軸，在 0 min、2 min、5 min、10 min、20 min、30 min、1 h、2 h、3 h、4 h 等關(guān)鍵節(jié)點，運用微量移液器精準吸取少量溶液樣本，隨即高速離心（轉(zhuǎn)速 ≥ 15000 rpm）分離微塑料與上清液。借助超靈敏熒光分光光度計，依據(jù)熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）原理，精確測量上清液中殘留質(zhì)粒 DNA 的熒光強度，進而換算出濃度變化，繪制吸附動力學曲線，深度解讀吸附速率的動態(tài)演進密碼。

營造恒溫恒濕的實驗條件，借助專業(yè)溫控水浴精準維持溶液溫度在 37°C。精細調(diào)控質(zhì)粒 DNA 濃度，構(gòu)建從 0.05 μg/mL 至 5 μg/mL 的梯度序列，同時固定聚苯乙烯微塑料添加量為 0.5 mg/mL。將溶液置于多通道渦旋振蕩儀上，以柔和且持續(xù)的振蕩促使吸附過程趨向平衡，全程利用動態(tài)光散射技術(shù)（DLS）實時監(jiān)測溶液體系的穩(wěn)定性，確保吸附過程真實可靠。

待吸附平衡達成，采用超速離心分離技術(shù)（轉(zhuǎn)速 ≥ 20000 rpm）迅速分離微塑料與上清液，運用紫外可見分光光度計測量上清液在特定波長下的吸光度，結(jié)合比爾定律推算殘留質(zhì)粒 DNA 濃度。借助專業(yè)軟件擬合 Langmuir、Freundlich 以及 Temkin 等多元吸附等溫模型，精準鎖定微塑料對質(zhì)粒 DNA 的最大吸附容量、吸附平衡常數(shù)等核心參數(shù)，全方面揭示吸附行為的內(nèi)在本質(zhì)。

以細胞培養(yǎng)的 “黃金法則" 為指導(dǎo)，將處于對數(shù)生長期、活力四射的細胞，按照每孔 0.8×10? 個細胞的精準密度接種至 96 孔板或 12 孔板，悉心培養(yǎng)至細胞單層緊密貼壁且融合度精準達到 75% - 85%，為轉(zhuǎn)染實驗鋪墊開端。

創(chuàng)新性地運用層層自組裝技術(shù)（LBL）制備含不同濃度聚苯乙烯微塑料吸附質(zhì)粒 DNA 的納米復(fù)合物，依據(jù)嚴謹?shù)膶嶒炘O(shè)計分組，將其逐孔精準滴加至細胞培養(yǎng)板，同步設(shè)立多維度對照組，包括僅含質(zhì)粒 DNA 的傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染陽性對照、不含任何添加物的空白細胞陰性對照以及僅含微塑料的潛在細胞毒性對照。轉(zhuǎn)染完成后，細胞被輕置于含 5% CO?、濕度 95%、溫度 37°C 的細胞培養(yǎng) “夢幻艙" 內(nèi)，持續(xù)孵育。

借助活細胞成像系統(tǒng)，實時、無損地觀測細胞形態(tài)動態(tài)演變；運用高內(nèi)涵分析技術(shù)（HCA），結(jié)合熒光標記與圖像識別算法，全方面量化綠色熒光蛋白（若轉(zhuǎn)染此基因）或熒光素酶（對應(yīng)基因轉(zhuǎn)染）的表達強度與分布模式，精準刻畫轉(zhuǎn)染效果；并在 24 h、36 h、48 h、60 h、72 h 等關(guān)鍵時間戳，收集細胞進行蛋白質(zhì)免疫印跡（Western blot）與實時定量聚合酶鏈反應(yīng)（RT-qPCR）檢測，從蛋白與核酸水平雙重鎖定目的基因表達豐度，深度挖掘微塑料對質(zhì)粒 DNA 轉(zhuǎn)染的影響 “黑匣子"。