多孔細胞培養(yǎng)板的操作步驟介紹
閱讀:1693 發(fā)布時間:2023-3-13
多孔細胞培養(yǎng)板是一種用于細胞培養(yǎng)的實驗室用品,通過其多孔的表面可以讓細胞黏附并生長,通常用于細胞的分離、擴增和實驗室研究等方面。
多孔細胞培養(yǎng)板的作用:
1.可以用于細胞分離和單克隆細胞的制備;
2.可以用于細胞擴增和培養(yǎng);
3.可以用于細胞實驗和研究,如細胞增殖、轉(zhuǎn)化和凋亡等。
多孔細胞培養(yǎng)板的操作步驟:
1.加樣品:將標本稀釋液100ul(或2滴)加到包被板內(nèi)(預留陰陽性及空白對照2-5孔),將待檢血清用PBS或生理鹽水按1:20稀釋后取10ul加入反應孔內(nèi)。
2.加對照:加入陰性對照1-3孔,陽性對照1孔,各100ul對照血清??瞻讓φ?孔空置。
3.溫育:將反應板震蕩使樣品混勻后,置37℃溫箱或水浴反應20分鐘。
4.洗板:用蒸餾水將濃縮洗滌液15ml稀釋至300ml。(1)手洗:將反應板孔內(nèi)容物傾出,將洗滌液注滿反應孔,放置30秒鐘后用力甩去,如此重復5次后拍干。(2)機洗:5次,每孔注入洗滌液200ul或注滿,停留30秒鐘后吸盡拍干。
5.加酶標工作液:每孔加入100ul(或2滴)酶標工作液,置37℃溫箱反應20分鐘后,洗板5次,洗板操作同步驟4。
6.顯色和終止反應:將底物A、B液各50ul(或1滴)加到反應孔內(nèi),37℃避光顯色10分鐘。每孔加入終止液50ul(或1滴)混勻終止反應。