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廣州宇烽生物科技有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第5年

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BIOEXPLORER ECL化學(xué)底物發(fā)光液
L-谷氨酰胺
潮霉素B
B27
RNA提取試劑
CCK8
培養(yǎng)基
二甲基亞砜(DMSO) BIOEXPLORER N2添加劑 細(xì)胞衛(wèi)士 轉(zhuǎn)染相關(guān)試劑 培養(yǎng)基營養(yǎng)添加劑 抗生素 無糖培養(yǎng)基 Hyclone雙抗 Hyclone胰酶 HYCLONEa-MEM培養(yǎng)基 HYCLONEMEM培養(yǎng)基 HYCLONEM199培養(yǎng)基 HYCLONEDME/F12培養(yǎng)基 HYCLONE改良型1640培養(yǎng)基 HYCLONE DPBS緩沖液 HYCLONEPBS HYCLONEDMEM低糖培養(yǎng)基 HYCLONEDMEM高糖培養(yǎng)基 高糖培養(yǎng)基 HYCLONE IMDM HYCLONE Leibovitz's L-15 培養(yǎng)基 HYCLONE McCoy’s5A 培養(yǎng)基 SIGMA二甲基亞砜(DMSO) BIOEXPLORER 蒸餾水 BIOEXPLORER(百傲樂)DMEM低糖培養(yǎng)基 BIOEXPLORER DMEM高糖培養(yǎng)基 BIOEXPLORER(百傲樂)DMEM無糖培養(yǎng)基 BIOEXPLORER(百傲樂)培養(yǎng)基 BIOEXPLORER 超純水 BIOEXPLORER 緩沖液 BIOEXPLORER(百傲樂)胰酶 PBS緩沖液 HYCLONE HBSS緩沖液 BIOEXPLORER(百傲樂)牛血清白蛋白
胎牛血清
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實(shí)驗(yàn)室儀器

無血清非程序凍存液的基礎(chǔ)知識(shí)介紹

時(shí)間:2023/7/24閱讀:860
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   產(chǎn)品簡介
  在細(xì)胞體外培養(yǎng)工作中,為了達(dá)到長期保存細(xì)胞的生物活性的目的,須將細(xì)胞進(jìn)行冷凍保存,并在實(shí)驗(yàn)需要的時(shí)候?qū)⑵渲匦聫?fù)蘇和培養(yǎng)。目前,細(xì)胞凍存常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用添加適量保護(hù)劑使細(xì)胞緩慢降溫至zhi定溫度范圍,從而到達(dá)保護(hù)細(xì)胞的目的。
  即用型無血清非程序凍存液是技術(shù)團(tuán)隊(duì)在長期的細(xì)胞研究過程中針對(duì)細(xì)胞的凍存和復(fù)蘇不斷優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,面向數(shù)百種細(xì)胞研發(fā)出的專用凍存液產(chǎn)品。
  該產(chǎn)品添加了細(xì)胞沉降穩(wěn)定劑,可延緩細(xì)胞在凍存過程中的沉降速率,防止細(xì)胞互相擠壓,影響細(xì)胞凍存效果。另外,添加了細(xì)胞膜保護(hù)劑、滲透性細(xì)胞膜內(nèi)保護(hù)劑、非滲透性細(xì)胞保護(hù)劑等多種冷凍保護(hù)劑,這些成分在溶液中同水分子結(jié)合,發(fā)生水合作用,弱化水的結(jié)晶過程使溶液的粘性增加從而少冰晶的形成,能大大降低細(xì)胞在凍存過程中冰晶對(duì)于細(xì)胞的損傷,有效提高細(xì)胞復(fù)蘇存活率。該產(chǎn)品配方成分明確,不含血清、不含動(dòng)物源性蛋白,可減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細(xì)胞的安全;不僅適用于常規(guī)細(xì)胞系、原代細(xì)胞,同時(shí)亦適合于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。
  與傳統(tǒng)凍存液相比,無需繁瑣費(fèi)時(shí)的程序凍存步驟或價(jià)格高昂的程序降溫儀,可直接重懸細(xì)胞后置于-80℃,次日轉(zhuǎn)移到液氮完成整個(gè)凍存過程,節(jié)省大量的時(shí)間和精力。
  產(chǎn)品特點(diǎn)
  1、即用型細(xì)胞凍存液,隨用隨取,2-8℃穩(wěn)定保存1年以上;
  2、無需繁瑣的程序凍存步驟或昂貴的程序降溫儀,直接放入-80℃冰箱,節(jié)省大量的時(shí)間和精力;
  3、細(xì)胞復(fù)蘇率高達(dá)90%以上,適用于大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的凍存;
  4、不含血清,批次間差異??;
  5、能夠有效維持干細(xì)胞的多向分化潛能;
  6、化學(xué)成分明確,沒有添加任何外源蛋白,減少細(xì)胞污染機(jī)會(huì),同時(shí)減少外源蛋白對(duì)細(xì)胞正常生長和分化的影響。
  使用說明
  (一)細(xì)胞凍存
  1、選擇對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞(90%左右),并保證在凍存前24h 內(nèi)換液一次,收集細(xì)胞,并將細(xì)胞制備成單細(xì)胞懸液(貼壁細(xì)胞可能需要用胰酶消化),計(jì)數(shù);
  2、將細(xì)胞懸液1000r/min 離心5min,棄上清;
  3、向細(xì)胞沉淀物中加入細(xì)胞凍存液,輕輕吹打,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞密度達(dá)到5×10?~1×10?個(gè)/mL;
  4、將上述細(xì)胞懸液按1ml~1.5ml 的量,分裝于無菌細(xì)胞凍存管內(nèi),擰緊管蓋,并做好標(biāo)記;
  5、將凍存管直接置于-80℃冰箱中,24 h后移入液氮長期保存。
  (二)細(xì)胞復(fù)蘇
  1、從液氮罐中取出凍存的細(xì)胞,立即放入37℃水浴鍋中快速解凍(操作時(shí)切勿使水浸沒凍存管口,以免造成細(xì)胞污染);
  2、待細(xì)胞凍存管中凍存液*融化后,立即逐滴加入少量細(xì)胞*培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞進(jìn)行混合,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有8~10mL該細(xì)胞*培養(yǎng)基的試管中,輕輕混合均勻;1000r/min離心5min,棄上清;
  3、加入1~2mL*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,按照合適的接種密度將細(xì)胞接種到細(xì)胞培養(yǎng)容器中,加入適量的已預(yù)熱的新鮮的細(xì)胞*培養(yǎng)基;
  4、輕輕搖晃培養(yǎng)器皿,使細(xì)胞分布均勻,靜置于37℃、飽和濕度細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
  產(chǎn)品穩(wěn)定性及保存條件
  1、置于2~8℃避光保存,有效期為1年;置于-20℃保存,有效期為3年;
  2、本產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,超過保質(zhì)期,必須放棄使用;
  3、為確保產(chǎn)品質(zhì)量,請(qǐng)避免反復(fù)凍融相關(guān)產(chǎn)品。
  注意事項(xiàng)
  1、凍存細(xì)胞分裝至凍存管后,應(yīng)減少在室溫/4℃存放時(shí)間,盡快移入到-80℃超低溫冰箱;
  2、對(duì)于原代胚胎干細(xì)胞/iPS細(xì)胞/其它珍貴細(xì)胞樣本等凍存時(shí),我們建議您在使用前,事先對(duì)所凍存的細(xì)胞進(jìn)行至少為期1周的細(xì)胞凍存測試實(shí)驗(yàn),確認(rèn)沒問題后再進(jìn)行正式凍存;
  3、本產(chǎn)品經(jīng)3次0.22μm過濾除菌,使用本產(chǎn)品時(shí)應(yīng)注意無菌操作,避免污染;
  4、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作;
  5、本產(chǎn)品僅用于科研用途,不可用于診斷、治療、臨床及其他用途。
  以上知識(shí)僅供參考希望能幫助到您!

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