目前，將外源 DNA 導入哺乳動物細胞的方法大致可分為兩大類，即生物方法和物理化學方法。生物方法主要以病毒作為載體，通過病毒感染的方式將外源 DNA 導入到細胞中，其中以逆轉(zhuǎn)錄病毒及腺病毒轉(zhuǎn)染系統(tǒng)最為常用。物理化學方法中常用的有磷酸鈣法、脂質(zhì)體介導的轉(zhuǎn)染、顯微 注射、電穿孔，以及最近出現(xiàn)的以高分子聚合物為載體的基 因傳遞技術(shù)。其中常用的是化學方法，磷酸鈣、聚乙烯亞胺（PEI）、脂質(zhì)體等化學試劑較為常用，那么接下來著重探討一下PEI轉(zhuǎn)染試劑的作用原理及比較吧。
PEI轉(zhuǎn)染試劑的作用原理
使用廣泛的陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑是PEI。PEI制備簡單，價格便宜，有線狀和枝狀兩種商業(yè)試劑可選。自19世紀 70年代發(fā)現(xiàn)PEI可以結(jié)合DNA質(zhì)粒，直到20年后，PEI才真正用于哺乳動物細胞轉(zhuǎn)染，成為非常有潛力的非病毒質(zhì)粒載體試劑。由于PEI帶正電荷，與帶負電荷的DNA結(jié)合形成帶正電荷的PEI-DNA復合物，可以與帶負電荷的細胞表面結(jié)合。PEI-DNA復合物通過胞吞作用進入細胞內(nèi)部形成內(nèi)涵體，之后一部分從內(nèi)涵體中逃逸進入細胞核內(nèi)，未逃逸的進入溶酶體被降解，無法入核的DNA會在100min內(nèi)被胞漿中的DNA酶降解（如下圖）。每毫升轉(zhuǎn)染試劑和質(zhì)?；旌衔镄纬杉s1×1010個DNA/PEI復合物，大小為300nm左右。經(jīng)過15min孵育，轉(zhuǎn)染時每個細胞進入約250個 DNA/PEI 復合物。
不同 PEI 的比較
枝狀的800kD PEI是shou次報道的可用于多種細胞轉(zhuǎn)染的試劑，枝狀的25kD PEI（25B）用于HEK293細胞大規(guī)模瞬時轉(zhuǎn)染，其轉(zhuǎn)染效率較枝狀2kD、600kD、800kD 或線狀22kD PEI（22L）的高。 之后比較了枝狀70kD、50 ~ 100 kD、25kD PEI和線狀25 kD PEI（25L），結(jié)果表明25B和25L的轉(zhuǎn)染效率較高，適合于哺乳動物細胞轉(zhuǎn)染，但是 25L比25B更適用于懸浮哺乳動物細胞HEK293和CHO轉(zhuǎn)染。
polysciences轉(zhuǎn)染試劑
成立于1961年的美國Polysciences公司，是一家歷史久遠的化學品制造公司，產(chǎn)品廣泛應用于各個科研領(lǐng)域。Polysciences在PEI的制造工藝上具有長達20多年的經(jīng)驗，其經(jīng)典的PEI產(chǎn)品系列包括研究級產(chǎn)品PEI 25K，PEI MAX和Transporter 5，以及cGMP級MAXgene GMP（Figure 1），被廣泛用于抗體藥物和重組蛋白，臨床等級慢病毒和AAV病毒的大規(guī)模生產(chǎn)，為全球客戶提供成本效益高、供應穩(wěn)定和質(zhì)量可靠的選擇。在過去10年期間，相關(guān)產(chǎn)品已被用于國內(nèi)外多項臨床申報。
我司提供Polysciences品牌以下試劑：
貨號 | 名稱 | 規(guī)格 | 庫存 |
23966-1 | Polyethylenimine, Linear(MW25,000) | 1G | 現(xiàn)貨 |
24765-1 | Polyethylenimine Max (Mw 40,000) | 1G | 現(xiàn)貨 |
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