酶標(biāo)板作為載體的固相聚苯乙烯表面對(duì)抗原、抗體或抗原抗體符合物的吸附起到很重要的作用。在常用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中，參與免疫學(xué)反應(yīng)的抗原、抗體、標(biāo)記抗體或抗原的純度、濃度和比例；緩沖液種類(lèi)、濃度和離子強(qiáng)度、pH值和反應(yīng)溫度、時(shí)間等條件起著關(guān)鍵作用。
酶標(biāo)板的操作步驟說(shuō)明：
1、制備試劑
首先需要制備好所需的試劑，包括底物、緩沖液、顯色劑、反應(yīng)停止液等。制備時(shí)需注意化學(xué)品的存儲(chǔ)及使用條件，保證實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和安全性。
2、標(biāo)準(zhǔn)品制備
標(biāo)準(zhǔn)品是酶標(biāo)板實(shí)驗(yàn)中非常重要的一步，用來(lái)確定酶活性和樣品中酶的含量。制備標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)要根據(jù)試劑盒說(shuō)明書(shū)中給出的濃度進(jìn)行配制，制備出一系列濃度不同的標(biāo)準(zhǔn)品，用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
3、樣品處理
樣品處理是酶標(biāo)板實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵步驟，處理過(guò)程中應(yīng)注意樣品的來(lái)源、處理方法、濃度等因素。通常需要將樣品加入到已經(jīng)酶標(biāo)板孔中，之后進(jìn)行反應(yīng)和測(cè)量。
4、洗板
洗板是酶標(biāo)板實(shí)驗(yàn)中非常重要的一步，目的是清除冗余樣品和雜質(zhì)，讓酶標(biāo)板中的底物能夠全部反應(yīng)。具體操作步驟包括：將酶標(biāo)板中的試劑振蕩均勻后倒出，然后用20倍稀釋的洗板緩沖液均勻地注入每個(gè)孔中，靜置1-2分鐘后將緩沖液倒出，反復(fù)洗滌2-4次。
5、加底物
加底物是最后一步，目的是讓底物發(fā)生滴定反應(yīng)，使樣品產(chǎn)生顏色反應(yīng)。具體操作步驟包括：將加底物稀釋后均勻地注入每個(gè)孔中，靜置一定時(shí)間后觀察顏色變化。根據(jù)顏色反應(yīng)強(qiáng)度與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)比對(duì)可以推算樣品中的酶含量。
