高電場(chǎng)強(qiáng)度電泳時(shí)，除了降低核酸樣品的熱效應(yīng)，還需要注意以下問題：
防止凝膠破裂：高電場(chǎng)強(qiáng)度下，凝膠內(nèi)部會(huì)產(chǎn)生較大的應(yīng)力，容易導(dǎo)致凝膠破裂。因此，要確保凝膠的制備質(zhì)量，凝膠濃度均勻、凝固充分；同時(shí)，在電泳過程中要避免電泳槽受到震動(dòng)或碰撞。
避免電極腐蝕：高電場(chǎng)強(qiáng)度可能會(huì)加速電極的腐蝕，尤其是在長(zhǎng)時(shí)間電泳或使用高離子強(qiáng)度緩沖液時(shí)。應(yīng)選擇質(zhì)量好、耐腐蝕的電極，如鉑電極；定期檢查電極的狀況，如有腐蝕及時(shí)更換；并且在電泳結(jié)束后，及時(shí)清洗電極，去除表面的電解質(zhì)和雜質(zhì)。
注意安全：高電場(chǎng)強(qiáng)度電泳使用的電壓較高，存在觸電風(fēng)險(xiǎn)。操作時(shí)要確保電泳設(shè)備接地良好，使用絕緣手套和護(hù)目鏡等防護(hù)裝備；在電泳過程中，不要觸摸電泳槽和電極，避免發(fā)生觸電事故。
考慮核酸分子的構(gòu)象變化：高電場(chǎng)強(qiáng)度可能會(huì)使核酸分子的構(gòu)象發(fā)生變化，從而影響其遷移行為。對(duì)于一些特殊結(jié)構(gòu)的核酸分子，如超螺旋 DNA 或具有復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)的 RNA，可能需要在緩沖液中加入適量的輔助試劑，如尿素、甲酰胺等，以幫助維持核酸分子的天然構(gòu)象，保證電泳結(jié)果的準(zhǔn)確性。
防止樣品擴(kuò)散：高電場(chǎng)強(qiáng)度下，樣品在凝膠中的擴(kuò)散速度可能會(huì)加快，導(dǎo)致條帶變寬，分辨率下降?？赏ㄟ^在樣品中加入適量的蔗糖或甘油等密度試劑，增加樣品的密度，減少擴(kuò)散；同時(shí)，盡量縮短電泳時(shí)間，也有助于降低樣品的擴(kuò)散程度。
準(zhǔn)確選擇 Marker：由于高電場(chǎng)強(qiáng)度下核酸分子的遷移速度可能與常規(guī)條件不同，需要選擇合適的分子量 Marker 作為參照。最好選擇在高電場(chǎng)強(qiáng)度下遷移行為穩(wěn)定、條帶清晰的 Marker，以便準(zhǔn)確判斷核酸分子的大小和遷移情況。
確保設(shè)備穩(wěn)定：電泳設(shè)備的穩(wěn)定性對(duì)高電場(chǎng)強(qiáng)度電泳至關(guān)重要。使用前要檢查設(shè)備的電源、電極連接等是否正常，避免在電泳過程中出現(xiàn)電壓波動(dòng)或設(shè)備故障，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
中級(jí)會(huì)員·2年
