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CC96120Rosetta-gami 2 (DE3)pLacl 感受態(tài)
參考價: 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • CC96120 產(chǎn)品型號
  • 語純生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):32更新時間:2025-04-23 12:33:44

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10 ×100ul/100×100ul
貨號 CC96120 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥
Rosetta-gami 2 (DE3)pLacl 感受態(tài)
產(chǎn)品貨號:CC96120
產(chǎn)品規(guī)格:10 ×100ul/100×100ul
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進一步生產(chǎn)使用,不可用于臨床診斷或治療。
產(chǎn)品介紹

Rosetta-gami 2 (DE3)pLacl 感受態(tài)

產(chǎn)品簡介
Rosetta-gami 2 系列菌株是集合了 Rosetta 2 系列菌株和 Origami 2 系列菌株的優(yōu)點;Rosetta-gami 2
(DE3)系列菌株是來源于 Origami 2 系列菌株,在其染色體上帶有溶源性的 λDE3,可表達(dá) T7 RNA
聚合酶。由于該菌株不含卡納抗性,適用于 pET 系列載體及其他 T7 啟動子系列載體。該菌株攜帶
有 trxB 和 gor 基因突變,從而提高了含二硫鍵正確折疊蛋白的表達(dá)效率;同時帶有的 pLacIRARE2
質(zhì)粒(攜帶氯霉素抗性),除了能夠提供原 Rosetta(DE3)宿主菌含有 的 AUA, AGG, AGA, CUA,
CCC, 和 GGA 六個稀有密碼子的 tRNA 外,還提供了第七個稀有密碼子 CGG 的 tRNA,因而能夠增
強真核細(xì)胞蛋白在大腸桿菌中的表達(dá)水平。此外,LacI 蛋白也可以抑制 T7lac 啟動子在無誘導(dǎo)劑時
的本底表達(dá)。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測,Rosetta-gami 2 (DE3) pLacI 感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107
cfu/μg DNA
產(chǎn)品組成
組分 
Rosetta-gami 2 (DE3) pLacI
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL (DE3) F′[laclacIprogor522::Tn10
trxB pLacIRARE2 (CamR, StrR, TetR)
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
除 pLacIRARE2 外,無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥10cfu/μg pUC18 DNA
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保高轉(zhuǎn)化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。

Rosetta-gami 2 (DE3)pLacl 感受態(tài)

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