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CC96307AGL1感受態(tài)
參考價: | 面議 |
- CC96307 產(chǎn)品型號
- 語純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):74更新時間:2025-04-24 10:02:04
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- 聯(lián)系人:
- 語純生物
- 電話:
- 手機(jī):
- 15316728970
- 地址:
- 遠(yuǎn)著大廈 八樓 1087
- 網(wǎng)址:
- www.ycswcell.com/
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產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 ×100ul/100×100ul |
---|---|---|---|
貨號 | CC96307 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號:CC96307
產(chǎn)品規(guī)格:10 ×100ul/100×100ul
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用,不可用于臨床診斷或治療。
產(chǎn)品介紹
AGL1感受態(tài)
產(chǎn)品簡介
AGL1 菌株為 C58,RecA 型背景,核基因中含有篩選標(biāo)簽——利福平抗性基因 Rif 和羧芐青霉素抗
性基 因 Carb ,為了便于轉(zhuǎn)化操作 ,此菌株攜帶一無自身轉(zhuǎn)運功能的琥珀堿型 Ti 質(zhì)粒 pTiBo542DT
DNA ,此質(zhì)粒含有 vir 基因 ( vir 基因是 T-DNA 插入植物基因組必需的元件,pTiBo542DT-DNA
質(zhì)粒自身的 T-DNA 轉(zhuǎn)移功能被破壞,但可以幫助轉(zhuǎn)入的雙元載體 T-DNA 順利轉(zhuǎn)移)。
pTiBo542DT-DNA 型 Ti 質(zhì)粒含有篩選標(biāo)簽:Strep,賦予 AGL1 菌株鏈霉素抗性,適用于水稻、擬
南芥、楊樹等植物的轉(zhuǎn)基因操作,經(jīng) pCAMBIA2301 質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率 ≥ 5×103 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
AGL1
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:C58 RecA (Rif R/CarbR) Ti pTiBo542DT-DNA (StrepR) Succinamopine
存儲條件
-80 ℃保存; 請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
除琥珀堿型 Ti 質(zhì)粒 pTiBo542DT-DNA 外,無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥5×103 cfu/μg pCAMBIA2301 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,用手撥da管底混勻,依次于冰上靜置 10 分鐘、液氮 5 分
鐘(或干冰乙醇浴和-80℃冰凍)、37℃水浴 5 分鐘、冰浴 5 分鐘;
3.加入 900 μl 無抗生素的 YEB 液體培養(yǎng)基,于 28℃振蕩培養(yǎng) 2~3 小時;
4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌,留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的 YEB 平板
上,倒置放于 28 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng) 2-3 天(當(dāng)平板只含有 50 μg/ml Kan 時,28 ℃培養(yǎng) 48 h 即可;平板中同
時加入 50 μg/ml Kan,20 μg/ml Rif 時,需 28 ℃培養(yǎng) 60 h;如果使用的平板含有 50 μg/ml Rif 則需要 28 ℃
培養(yǎng) 72-90 h)。
注意事項
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
3. 利福平濃度不應(yīng)高于 25 μg/μl,過高的利福平濃度不利于農(nóng)桿菌生長,會降低其生長速度和轉(zhuǎn)化效率;
4.因為 Ti 質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略),所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時不考慮添加相應(yīng)抗生素。
AGL1感受態(tài)
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