聯(lián)系電話
上海語純生物科技有限公司
初級會員·1年
具體成交價以合同協(xié)議為準
產品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10^5 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | BH0282 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),制藥/生物制藥 |
產品貨號：BH0282
產品規(guī)格：5×10^5
本產品僅供科學研究或進一步生產使用，不可用于臨床診斷或治療。
產品介紹
HFF-1人皮膚成纖維細胞
細胞詳情 | |
細胞名稱 | 人皮膚成纖維細胞HFF-1 |
貨 號 | SAc0154 |
組織來源 | 新生男孩，皮膚，包皮 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞 |
生長方式 | 貼壁生長 |
描 述 | 飼養(yǎng)層細胞， 供H1、H9、HN4、HN1等hES使用。 |
培養(yǎng)條件 | DMEM，15%FBS，丙酮酸鈉；空氣95%，二氧化碳5%；37℃培養(yǎng) |
換液頻率 | 2-3天 |
傳代周期 | 3-4天 |
傳代比例 | 1:3-1:6 |
凍存液配方 | 基礎培養(yǎng)液，40%FBS，DMSO 10% |
安全性 | BSL-1 |
供應限制 | 僅供研究之用。 |
細胞操作詳細步驟----貼壁細胞
1.細胞復蘇
1.1離心法
1.1.1準備一個T25的細胞培養(yǎng)瓶并做好標記，預熱好的細胞專用培養(yǎng)基，一支15ml離心管，離心管中加入4-5ml細胞專用培養(yǎng)基。
1.1.2取出細胞凍存管，在37度水浴中快速解凍，將管子擦干并消毒后迅速拿回生物安全柜。
1.1.3將細胞懸液轉移到加有培養(yǎng)基的離心管中，1000轉離心5分鐘。
1.1.4倒掉上清，加入培養(yǎng)基輕輕重懸細胞亦可先將細胞團彈散后加入培養(yǎng)基混勻。
1.1.5將重懸好的細胞轉移到T25細胞培養(yǎng)瓶，補充培養(yǎng)基到8ml左右，十字搖晃，將細胞鋪勻后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
1.2不離心法
1.2.1準備一個T25的細胞培養(yǎng)瓶并做好標記，預熱好的細胞專用培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶中加入8ml左右培養(yǎng)基。
1.2.2取出細胞凍存管，在37度水浴中快速解凍，將管子擦干并消毒后迅速拿回生物安全柜。
1.2.3將細胞懸液轉移到加有培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，十字搖晃，將細胞鋪勻后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)，接種16小時后更換培養(yǎng)基。
2.細胞傳代
2.1準備細胞專用培養(yǎng)基，細胞培養(yǎng)瓶，胰酶（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA），DPBS。
2.2棄上清，并加2-3mlDPBS輕柔沖洗培養(yǎng)瓶內細胞1-2次。
2.3加入1ml胰酶，室溫或者37度消化，直到細胞成片脫落，加入3-4ml專用培養(yǎng)基終止消化，如果有成團塊脫落的細胞可輕輕吹打分散細胞后再終止消化。（注意：消化時間與所用胰酶效價，消化時候細胞密度以及溫度等因素有關，建議第一次消化時候，多在顯微鏡下觀察，以找到優(yōu)良消化時間）
2.4收集細胞懸液，1000轉離心5分鐘，棄上清，加入培養(yǎng)基輕輕重懸細胞亦可先將細胞團彈散后加入培養(yǎng)基混勻。
2.5將重懸好的細胞按比例分裝至T25細胞培養(yǎng)瓶，補充培養(yǎng)基到8ml左右，十字搖晃，將細胞鋪勻后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
3.細胞凍存
3.1準備細胞凍存液，細胞凍存管，胰酶（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA），DPBS。
3.2棄上清，并加2-3mlDPBS輕柔沖洗培養(yǎng)瓶內細胞1-2次。
3.3加入1ml胰酶，室溫或者37度消化，直到細胞成片脫落，加入專用培養(yǎng)基終止消化，如果有成團塊脫落的細胞可輕輕吹打分散細胞后再終止消化。
3.4收集細胞懸液，1000轉離心5分鐘，棄上清。
3.5加入凍存液，重懸細胞，并分裝到凍存管，凍存密度0.8-1.5×106細胞/ml。
3.6將凍存管放入程序降溫盒，并放到-80℃冰箱，過夜后將凍存管轉移到液氮保存。
4.注意事項
4.1建議收到細胞后先用我們配套的培養(yǎng)基和血清。收到活細胞的客戶培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基可回收使用，保存在4度可使用一周。
4.2不同實驗室操作上會有些許差異，為了避免細胞不適應，請先按照說明書推薦的方法和操作步驟培養(yǎng)，待細胞凍存后可根據自己的習慣操作看細胞是否能夠適應。
4.3建議收到細胞后，前幾代及時凍存一些細胞，并最好是可以多凍存幾個批次。
HFF-1人皮膚成纖維細胞
