諾博萊德 全血蛋白提取試劑盒（蛋白組實驗、質譜適用）

全血蛋白提取試劑盒（蛋白組實驗）常備現(xiàn)貨

產(chǎn)品貨號：P5089

產(chǎn)品名稱：全血蛋白提取試劑盒（蛋白組實驗、質譜適用）

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品簡介：

中文名稱：全血蛋白提取試劑盒（蛋白組實驗、質譜適用）

規(guī)格：100T ; 50T

儲存條件：2-8℃，1 year

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準

NobleRyder P5089 全血蛋白提取試劑盒（蛋白組實驗、質譜適用）

全血蛋白提取試劑盒（蛋白質組學實驗適用）適用于從各種動物抗凝/非抗凝全血樣品中提取總蛋白。提取過程簡單方便，可在1小時內完成。本試劑盒含有的du特配方能夠有效溶解細胞膜組份，包括細胞質膜、核膜和各種細胞器膜。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。本試劑盒可以用于凍存過的全血樣品的蛋白提取。本試劑盒的蛋白提取組份中不含有不可透析除去的去垢劑組份，不含SDS、TritonX-100、chaps等可能影響質譜實驗的組份，最后得到的蛋白質樣品經(jīng)過透析或者脫鹽處理后將不含有去垢劑、高濃度鹽等影響，基本可以滿足下游任意的蛋白質組學相關實驗研究。本產(chǎn)品的蛋白酶抑制劑混合物中不含AEBSF，可以避免由于AEBSF導致的質譜峰漂移，因此使用本產(chǎn)品提取的蛋白樣品可以用于質譜(MassSpectrometry,MS)檢測和分析，蛋白質組學(proteomics)等相關研究。本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構象的活性蛋白。本試劑盒中不含有EDTA，與金屬螯和層析等下游應用兼容。本試劑盒提取的蛋白也可用于WesternBlotting、蛋白質電泳、免疫沉淀、ELISA、轉錄活性分析、Gelshift凝膠阻滯實驗、酶活性測定等下游蛋白研究實驗。

適用樣本：動物全血

注：

1. 蛋白提取液A2、蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。

2. 蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。

3. 試劑拆封后請盡快使用完！

產(chǎn)品簡介：

全血蛋白提取試劑盒（蛋白質組學實驗適用）適用于從各種動物抗凝/非抗凝全血樣品中提取總蛋白。提取過程簡單方便，可在 1 小時內完成。

本試劑盒含有的du特配方能夠有效溶解細胞膜組份，包括細胞質膜、核膜和各種細胞器膜。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。

本試劑盒可以用于凍存過的全血樣品的蛋白提取。

本試劑盒的蛋白提取組份中不含有不可透析除去的去垢劑組份，不含 SDS、Triton X-100、chaps等可能影響質譜實驗的組份，最后得到的蛋白質樣品經(jīng)過透析或者脫鹽處理后將不含有去垢劑、高濃度鹽等成分，基本可以滿足下游任意的蛋白質組學相關實驗研究。

本產(chǎn)品的蛋白酶抑制劑混合物中不含 AEBSF，可以避免由于 AEBSF 導致的質譜峰漂移，因此使用本產(chǎn)品提取的蛋白樣品可以用于質譜(Mass Spectrometry, MS)檢測和分析，蛋白質組學(proteomics)等相關研究。

本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構象的活性蛋白。

本試劑盒中不含有 EDTA，與金屬螯和層析等下游應用兼容。

本試劑盒提取的蛋白也可用于 Western Blotting、蛋白質電泳、免疫沉淀、ELISA、轉錄活性分析、Gel shift 凝膠阻滯實驗、酶活性測定等下游蛋白研究實驗。

自備試劑和儀器：

離心機、振蕩器、渦旋混勻器、移液器、冰箱、冰盒，PBS 緩沖液、蛋白定量試劑盒，離心管、吸頭、一次性手套。

產(chǎn)品特點：

1、使用方便，從細胞，組織中提取蛋白不需經(jīng)過研磨、反復凍融、超聲破碎等前處理。

2、提取過程簡單方便，將蛋白提取的時間縮短至 30 分鐘-1 小時。

3、含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。

4、紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。

5、總蛋白提取液含多種有效成分，可以充分釋放胞漿蛋白、核蛋白和膜蛋白，又可結合釋出的蛋白防止沉淀。

6、蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含 5 種獨立的蛋白酶抑制劑 Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括絲an酸蛋白酶、半胱an酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

使用方法：

一、使用注意事項：

1. 預實驗很重要。必須要做預實驗，在正式實驗之前取少量樣本優(yōu)化實驗條件，并像正式樣本一樣認真進行，看實驗結果是否可行，實驗條件是否適合自己的樣本。由于生物樣本的多樣性，不同樣本的實驗條件通常差異較大，同種細胞的不同模型下需要的實驗條件也可能不同，為了避免浪費正式樣本和試劑，一定要提前預實驗優(yōu)化實驗條件。

2. 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。

3. 實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。

4. 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。

5. 可以根據(jù)自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。

6. 離心機轉速有相對離心力（RCF，×g）和每分鐘轉速（RPM，r/min）兩種表示方式，有些離心機設置有RPM和×g顯示切換，但部分離心機沒有自動切換功能。需要用下面的公式進行換算g=r×1.118×10^-5×rpm²（r為有效離心半徑，即從離心機軸心到離心收集管底部中心位置的長度，單位為厘米)例如:轉速為3000 rpm，有效離心半徑為10 cm，則相對離心力（RCF，×g）為=10×1.118×10^-5×3000²=1006.2（×g）。

二、全血蛋白提?。?/span>

1. 提取液制備：

將試劑A1、試劑A2、試劑A3混合，配成蛋白提取液A，充分混勻備用。

每500μl蛋白提取液A中加入2μl蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。

【注】：

1)蛋白提取液A 置4℃保存，長期不用的可以分裝后-20℃保存。

2)根據(jù)需要處理的樣品數(shù)量準備蛋白提取液，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。

3)加過蛋白酶抑制劑的提取液一周內未使用完，再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制劑。

4)以下步驟中使用的蛋白提取液為此步配制好的含蛋白酶抑制劑的提取液。

2. 取300μl全血樣本，加入300μl蛋白提取液，充分混勻后，在4℃條件下振蕩20-40分鐘。

【注】：

1)使用振蕩器/搖床的較低轉速，提取液能輕微晃動即可。

2)沒有振蕩條件也可以不振蕩，稍微延長提取液的處理時間，中間每隔幾分鐘用移液器吹打混勻即可。

3. 在4℃，14000×g 條件下離心10 分鐘。

4. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管，即可得到全血蛋白。

5. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灐?/span>

【注】：

1)建議用BCA 法進行蛋白定量。

2)蛋白樣品－80℃存放一年沒有問題。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被細菌污染。

3)全血樣品蛋白濃度較高，需要稀釋后用于下游實驗。

6. 將蛋白樣品透析處理或者脫鹽柱脫鹽處理后用于下游實驗。

【注】：

1)蛋白樣品中含有鹽，需要脫鹽處理后用于等電聚焦/雙向電泳。

2)經(jīng)透析或脫鹽離心柱處理的蛋白樣品不含有去垢劑和高濃度鹽。

注意事項：

1. 本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。

2. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并che底清除殘留清潔劑。

3. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。

4. 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

5. 如果試劑不小心接觸皮膚或眼睛，應立即用水沖洗。

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