目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>試劑盒>> DNA 濃度測(cè)定試劑盒（Hoechst 33258 法）
| 參考價(jià) | ￥ 700 |
| 訂貨量 | ≥1盒 |
| ￥700 |
| ≥1盒 |
更新時(shí)間：2025-05-19 15:16:17瀏覽次數(shù)：84評(píng)價(jià)
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100次 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | XY-D-1584 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 科研 | 英文名稱 | DNA Concentration Assay Kit (Hoechst 33258 Method) |
| 保存條件 | -20℃ | 有效期 | 6個(gè)月 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
對(duì) dsDNA 進(jìn)行準(zhǔn)確定量是很多重要的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的前提。不同的定量方法有不同的線性范圍和檢測(cè)靈敏度，對(duì)干擾的屏蔽能力也各不相同。其中， OD260 測(cè)定法操作最-簡(jiǎn)單，但靈敏度只有 5 μg/mL，不能屏蔽單鏈 DNA、RNA 和核苷酸的干擾。為此本公司開發(fā)了基于 Hoechst 33258 熒光染料的 dsDNA 定量產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
1.即開即用，用戶不需要單獨(dú)摸索最佳條件。
2.操作簡(jiǎn)單，只需要將 Hoechst 33258 工作液與待測(cè)樣品混合即可。
3.徹-底屏蔽 RNA 的干擾，同樣濃度 RNA 產(chǎn)生的熒光不超過 DNA 的 1%，尤其適用于直接用細(xì)胞裂解液測(cè)定 DNA 濃度（此時(shí)有大量RNA 存在）。
4.能部分屏蔽單鏈 DNA 的干擾。Hoechst 33258 熒光染料與單鏈 DNA 結(jié)合時(shí)發(fā)出的熒光并不會(huì)與單鏈DNA 濃度成比例。
5.需要激發(fā)波長(zhǎng)為 365 nm，發(fā)射波長(zhǎng)為 458 nm 的熒光儀。
6.可選用比色皿檢測(cè)模式，也可選用多孔板檢測(cè)模式。
7.靈敏度比 OD260 測(cè)定法高 500 倍，為 10 ng/mL。
8.線性范圍為 10 ng/mL-10 μg/mL（相當(dāng)于 10 pg/μL-10 ng/μL）。
9.Hoechst 33258 染料對(duì)dsDNA 具有高度選擇性，主要識(shí)別AT 區(qū)。
10.提供dsDNA 定量對(duì)照，用于制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。dsDNA 定量對(duì)照AT 含量為 59%。
11.本產(chǎn)品足夠 100 次 100 μL 體系的測(cè)定，每次用 10 μL 樣品。
12.DNA 濃度測(cè)定試劑盒（Hoechst 33258 法）只能用于科研。
產(chǎn)品參數(shù)：
規(guī)格及成分
| 成分 | 規(guī)格 | 包裝 |
20×Hoechst 33258-DNA 結(jié)合液 | 10ML | 10 mL 本色瓶 |
| dsDNA 定量對(duì)照，10 mg/mL | 1ML | 1.5 mL 本色管 |
| Hoechst 33258 染液 | 10ML | 10 mL 棕塑瓶 |
| 使用手冊(cè) | 1份 | 無(wú) |
保存和運(yùn)輸
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期半年。
自備試劑
超純水，能檢測(cè)激發(fā)波長(zhǎng)為 365 nm，發(fā)射波長(zhǎng)為 458 nm 的熒光儀。
使用方法：
1.將 DNA 標(biāo)準(zhǔn)品用 Hoechst 33258-DNA 結(jié)合液稀釋成 1 mg/mL，此為工作液，放冰上待用。
2.打開儀器預(yù)熱 10-15 分鐘。
3.用超純水將 20×Hoechst 33258-DNA 結(jié)合液稀釋到 1×，用多少稀釋多少。
4.用 1×Hoechst 33258-DNA 結(jié)合液將本試劑盒提供的dsDNA 定量對(duì)照梯度稀釋成 1 mg/mL、100 μg/mL、10 μg/mL、1 μg/mL、100 ng/mL、10 ng/mL共六個(gè)濃度，各取 100 μL 到離心管中放常溫待用。
5.取 1×Hoechst 33258-DNA 結(jié)合液 100 μL 到離心管中作為空白對(duì)照。
6.對(duì) N 個(gè)待測(cè)樣本，如果是待測(cè) DNA 溶液，則取 10-100 μL 到離心管中，補(bǔ) 1×Hoechst 33258-DNA 結(jié)合液到總體積為 100 μL；如果是細(xì)胞裂解液，則稀釋細(xì)胞裂解液使其 SDS 的濃度不超過 0.02%。如果超過此濃度，將在下步會(huì)降低熒光讀數(shù)。
7.在上述 6+1+N 個(gè)離心管中各加 100 μL Hoechst 33258 染液，充分震蕩混合。
8.40℃放置 20 分鐘。
9.測(cè)定 458 nm 光吸收（激發(fā)波長(zhǎng)為 365 nm）。
10.所有光吸收數(shù)值減去空白對(duì)照數(shù)值，然后根據(jù)此數(shù)值制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，再用 N 各樣本的數(shù)值從標(biāo)準(zhǔn)曲線中推出檢測(cè)管中樣本的 DNA 濃度，再根據(jù)稀釋倍數(shù)計(jì)算出稀釋前樣本中 DNA 的濃度。
選擇我們的DNA 濃度測(cè)定試劑盒（Hoechst 33258 法），就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測(cè)方案，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航！
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