目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學試劑>>染料>> 核酸電泳染料(紫外光型)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1.5 mL |
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貨號 | XY-D-1681 | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | / |
保存條件 | 常溫 | 有效期 | 12個月 |
產(chǎn)品簡介:
目前最常見的替代 EB 的核酸染料 SYBR Green I(屬于花氰類染料)雖然毒性比EB 低、靈敏度比 EB 高,但由于其化學穩(wěn)定性差(怕光、怕水、怕熱),實驗結果的重復性差;此外,SYBR Green I 在電泳過程中能在 DNA 分子間移位,使 DNA 條帶模糊和扭曲,使得電泳清晰度和分辨率不如 EB。所以在實際應用中依然不能有效替代EB。本產(chǎn)品是同時具有 EB 穩(wěn)定性和 SYBR Green I 低毒性的新性核酸染料。
產(chǎn)品特點:
1.低毒。其主要成分未發(fā)現(xiàn)對人體有致癌性、未被列入有毒有害品,有利于保護使用者的健康和保護日益惡化的環(huán)境。
2.靈敏。檢測靈敏度跟 EB 相當,能滿足常規(guī)核酸電泳實驗要求。
3.穩(wěn)定。對光、水和熱的穩(wěn)定性跟 EB 相當,可加入瓊脂糖凝膠中反復熔化。
4.無分子間位移現(xiàn)象。不會出現(xiàn) SYBR 染料常見的條帶模糊和扭曲現(xiàn)象。
5.使用方法多樣。既可以加入熔化的膠中,也可以電泳后染色,還可用于 PAGE。
6.跟各種常用的核酸電泳緩沖液(如TBE、TAE)兼容,但在 TBE 中背景最-低。
7.觀察時可以使用現(xiàn)成的觀察 EB 的 300nm UV 紫外儀。
8.既可用用于 DNA 電泳染色,也可用于 RNA 電泳染色。
9.DNA 或 RNA 濃度較高時還可以直接在日光下觀察(需要將膠放在黑色背景下)。由于避免了 UV 對 DNA 的傷害,尤其適用于膠回收實驗。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品規(guī)格
成份規(guī)格包裝
核酸電泳染料(紫外光型)1.5 mL1.5 mL 棕色管
使用手冊1 份無
保存和運輸
常溫運輸,4℃保存,有效期一年。
自備試劑
電泳緩沖液和瓊脂糖凝膠
使用方法:
注意:雖然本產(chǎn)品的主要成分未發(fā)現(xiàn)對人體有致癌性、未被列入有毒有害品,但操作時最好還是戴上塑料手套。
使用方法之一:電泳中染色 DNA(RNA 的染色跟DNA 完-全一樣)。
本方法是將本產(chǎn)品直接加入溶化的凝膠中使用,只適用于瓊脂糖凝膠電泳,不適用于
PAGE。
1. 將本產(chǎn)品直接加入到融化的瓊脂糖凝膠中,每 100mL 凝膠加 5 uL 本產(chǎn)品(如果
用 TBE 緩沖液)或電泳染色,混合均勻后倒膠。瓊脂糖凝膠中不能含任何其他染料(如 EB 和 SYBR Green I,否則會相互干擾)。注意:一定要保證瓊脂糖徹-底熔化,尤其是在第一次熔化膠的時候,否則未熔化的小顆粒將產(chǎn)生跟染料相同的熒光。
2.將 DNA 樣品與 DNA 上樣液按比例混合后上樣。注意:一定要使用不含 SDS 等去污劑的上樣液,否則 SDS 會跟染料結合,極大地降低靈敏度。
3.上樣后電泳,電泳參數(shù)同常規(guī)的電泳。
4.電泳結束后在 300 nm 左右的 UV 下觀察。注意:不要使用波長為 260 nm 或 360 nm 的 UV,否則檢測靈敏度會降低。如果 DNA 或 RNA 濃度較高,還可以直接在日光下直接觀察(需要將膠放在黑色背景下),避免 UV 對 DNA 的傷害,尤其適用于膠回收實驗。
注:顯色結果:在紫外下,DNA 濃度非常高的時候是白色,濃度低的時候是綠色的, 單鏈核酸有時是紅色的。
使用方法之二:電泳后染色 DNA
本方法是在電泳后對 DNA 進行染色,適用于瓊脂糖凝膠電泳和PAGE。但該方法需要
單獨的染色處理,染料用量較大,不推薦用于瓊脂糖凝膠的染色。
1.按照常規(guī)方法進行電泳。
2.用去離子水將本產(chǎn)品稀釋 10000 倍后(100 mL 水需要加 10 uL 本產(chǎn)品),將凝膠放入,室溫下?lián)u晃染色 30 分鐘(對瓊脂糖凝膠)或 15 分鐘(對PAGE)。
3.用水脫色 10-30 分鐘,具體時間需根據(jù)背景強弱決定,其余同方法一。注意:電泳后染色液可以反復使用次數(shù)。
選擇我們的核酸電泳染料(紫外光型),就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案,為您的科研實驗保駕護航!