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PCR基因擴(kuò)增儀你真的了解嗎?

閱讀:1754      發(fā)布時間:2022-4-12
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  PCR基因擴(kuò)增儀應(yīng)安放在濕度較低、灰塵較少并遠(yuǎn)離水源(如靠近水池、水管等)的地方,室內(nèi)應(yīng)通風(fēng)良好,無腐蝕性氣體或強(qiáng)磁場干擾。不要將儀器安放在潮濕的或灰塵較多的地方。儀器上的開口都是為了通風(fēng)而設(shè),為了避免溫度過熱,一定不要阻塞或覆蓋這些通風(fēng)孔。單臺儀器使用時,儀器的通風(fēng)孔與物體的距離應(yīng)不小于50cm。另外不要在松軟的表面上使用儀器,否則可能會阻塞儀器底部的進(jìn)風(fēng)孔。溫度過高會影響儀器的性能或引起故障。不要在陽光直射的地方使用本儀器,并要遠(yuǎn)離暖氣、爐子以及其它一切熱源。長時間不使用本儀器時,應(yīng)拔下電源插頭,并用軟布或塑料紙覆蓋儀器以防止灰塵進(jìn)入。
  PCR基因擴(kuò)增儀你真的了解嗎?
  加熱模塊:上孔與孔之間的溫度一致性對于獲取可靠而可重復(fù)的PCR結(jié)果也是至關(guān)重要的。確保熱準(zhǔn)確性的一種方法就是經(jīng)常使用溫度驗證試劑盒進(jìn)行檢測,溫度驗證檢測通??捎糜冢?/div>
  在等溫模式下相對于設(shè)定溫度的孔間準(zhǔn)確性;
  在溫度轉(zhuǎn)換后相對于設(shè)定溫度的孔間準(zhǔn)確性;
  熱蓋溫度的準(zhǔn)確性。
  引物退火溫度控制:梯度溫度控制是PCR儀一項有助于PCR中引物退火優(yōu)化的功能。梯度設(shè)定的目的是在模塊之間實現(xiàn)變化的溫度,通過每列之間≥2°C的溫度升降,可同時對于不同溫度進(jìn)行測試以獲取引物退火溫度。理論上,梯度可在模塊之間實現(xiàn)線性的溫度。
  PCR基因擴(kuò)增儀對于樣品溫度控制的能力對于PCR結(jié)果的準(zhǔn)確性十分重要。儀器特異性的參數(shù)如升降溫速度,維持時間以及算法對于預(yù)測樣品溫度是關(guān)鍵。升降溫速度意味著在一定時間內(nèi)發(fā)生的PCR步驟之間的溫度變化。由于熱量從模塊傳輸至樣品需要一定的時間,樣品實際的升降溫速度會較慢。因此,對于變溫速度的定義需要進(jìn)行區(qū)分和了解。

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