A=lgI。/I=K。b

式中，A為吸光度；I。為入射光強(qiáng)度；I為透射光強(qiáng)度；b為液層厚度（即光程）；K。為比例常數(shù)。

1852年，比爾研究了各種無(wú)機(jī)鹽的水溶液對(duì)紅光的吸收后指出：光的吸收和光所遇到的吸光度的數(shù)量有關(guān)；如果吸光物質(zhì)于不吸光的溶劑中，則吸光度和吸光物質(zhì)的濃度成正比，這就是比爾定律，其數(shù)學(xué)表達(dá)式為：

A=lgI。/I=K1C

式中，A為吸光度；I。為入射光強(qiáng)度；I為透射光強(qiáng)度；C為溶液的濃度；K1為比例常數(shù)。

將瑯伯定律和比爾定律結(jié)合起來(lái)，則為瑯伯-比爾定律，公式如下：

A=lgI。/I=K2bC

式中，A為吸光度；I。為入射光強(qiáng)度；I為透射光強(qiáng)度；C為溶液的濃度；b為液層厚度（即光程）；K1為比例常數(shù)。

比爾定律認(rèn)為：當(dāng)一束光平行的單色光通過(guò)某一均勻的有色溶液時(shí)，溶液的吸光度與溶液的濃度和光程的乘積成正比，這就是瑯伯-比爾定律的真正物理意義，它是光度分析中定量分析的zui基礎(chǔ)、zui根本的依據(jù)，也是紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的基本原理。