一、不同的ATCC細胞，喜歡的環(huán)境是不一樣的。

這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同，還有就是ATCC細胞生長的空間密度問題,有一些ATCC細胞是數量多一點比較好生長，生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的ATCC細胞。譬如內皮ATCC細胞。而有一些是ATCC細胞是數量少一點ATCC細胞狀態(tài)會生長的比較好，譬如巨噬ATCC細胞和某些腫瘤ATCC細胞。

尤其是巨噬ATCC細胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應該留很少量的ATCC細胞，這樣ATCC細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬ATCC細胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，ATCC細胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結果是不好的。所以在養(yǎng)ATCC細胞的時候應該摸索該ATCC細胞喜歡的生長空間密度問題。

二、對于有些人總是會遇到養(yǎng)的ATCC細胞形態(tài)怎么都不好的問題。

這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁ATCC細胞，如果ATCC細胞形態(tài)不好，（或者ATCC細胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作：

首先：倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進行預吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬ATCC細胞我們只吹打，不消化的）

其次：把吹打下來的ATCC細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內培養(yǎng)，按時間點觀察ATCC細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經有部分ATCC細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入*培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察ATCC細胞生長情況以及形態(tài)。

如果一次效果還不理想，可重復多次。直到找到ATCC細胞形態(tài)。其中要注意，結合ATCC細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數量長得好的ATCC細胞你就等貼壁ATCC細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。

三、ATCC細胞關于培養(yǎng)瓶內加入培養(yǎng)基的量的問題。

這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的ATCC細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml，大方瓶14ml的。有些ATCC細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反ATCC細胞形態(tài)會長得比較好。（可能也是競爭很大，有優(yōu)勝劣汰吧。）對于生長速度快的ATCC細胞，易生長的ATCC細胞加少一點培養(yǎng)基ATCC細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。

四、關于選擇培養(yǎng)瓶的問題。

有時發(fā)現(xiàn)生長速度快的ATCC細胞在玻璃瓶內生長的狀態(tài)會比一次性塑料瓶相對好一些。而對于同一種ATCC細胞，在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內的生長狀態(tài)也比塑料瓶內好。

這可能是因為塑料瓶比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的ATCC細胞在塑料瓶這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。

所以對于生長速度慢的ATCC細胞如果想要更漂亮的ATCC細胞狀態(tài)，塑料瓶比玻璃瓶會好，對于生長速度慢的ATCC細胞，玻璃瓶則會更好。同樣，對于同一種ATCC細胞，在其生長速度慢的時候，塑料瓶會好一點，比如剛剛復蘇的時候，或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候，ATCC細胞玻璃瓶則相對會好一點。