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超高效液相色譜其使用一般包括以下步驟

來源:科曉(北京)科技有限公司   2025年02月03日 11:00  
  超高效液相色譜是一種高效、快速的分析分離技術,通常由高壓溶劑輸送單元、低死體積的色譜系統(tǒng)、快速的檢測器、快速自動進樣器和高速數(shù)據(jù)采集、控制系統(tǒng)等組成。這些組件的協(xié)同作用,使得超高效液相色譜能夠實現(xiàn)高效、快速、靈敏的分析分離。廣泛應用于醫(yī)藥、環(huán)保、石化、食品、化工等行業(yè)。在醫(yī)藥領域,它可用于藥物分析、藥物代謝研究等;在環(huán)保領域,它可用于水質(zhì)監(jiān)測、空氣污染物分析等;在石化領域,它可用于石油產(chǎn)品分析、催化劑評價等;在食品和化工領域,它可用于食品添加劑檢測、產(chǎn)品質(zhì)量控制等。
  超高效液相色譜的使用方法一般包括以下步驟:
  1、儀器準備
  清潔:仔細清潔采樣室、進樣器以及管道等部件,使用純凈溶劑清洗流道,確保系統(tǒng)無雜質(zhì)污染,同時檢查溶劑瓶和毛細管是否清潔,避免對樣品造成污染。
  校準:根據(jù)實驗要求選擇合適的校準標準品,并按照制定的方法進行準備,確保校準標準品質(zhì)量可靠、濃度準確。
  2、開機與參數(shù)設置
  開啟儀器:依次打開計算機、液相色譜儀主機電源開關,等待儀器自檢完成。
  設置參數(shù):在工作站軟件中設置泵的流量、壓力上限,檢測器的波長、靈敏度等參數(shù)。設置流動相的比例、流速、柱溫等色譜條件,這些參數(shù)需要根據(jù)待分析的樣品和所選用的色譜柱來優(yōu)化確定。
  3、樣品制備與進樣
  樣品制備:根據(jù)樣品的性質(zhì)和分析要求,對樣品進行適當?shù)奶幚?,如提取、過濾、稀釋等,以確保樣品溶液的濃度和純度符合分析要求,并且不會對色譜柱造成損害。
  進樣:將處理好的樣品溶液注入進樣器中,注意進樣量的控制,一般UPLC的進樣量較小,通常在微升級別??梢允褂檬謩舆M樣或自動進樣器進樣。
  4、數(shù)據(jù)采集與分析
  啟動采集:點擊工作站軟件中的“開始”按鈕,啟動泵輸送流動相,使樣品在色譜柱中分離,同時檢測器開始采集數(shù)據(jù)。在數(shù)據(jù)采集過程中,要密切觀察基線的穩(wěn)定性和色譜峰的分離情況。
  數(shù)據(jù)分析:數(shù)據(jù)采集完成后,使用工作站軟件對色譜圖進行處理和分析。可以對色譜峰進行積分、定性和定量分析,確定樣品中各組分的含量和身份。
  5、關機與維護
  關機:分析結束后,先關閉檢測器的電源,然后關閉泵的電源,最后關閉計算機。
  清洗維護:使用合適的溶劑沖洗色譜柱和流路系統(tǒng),以去除殘留的樣品和流動相,防止堵塞和污染。定期對儀器進行維護保養(yǎng),檢查儀器的性能和部件的運行狀況,及時更換磨損或損壞的部件。

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