二手ABI QuantStudio™ 5 實時熒光定量PCR儀技術(shù)評估與應(yīng)用介紹

一、儀器概述

QuantStudio™ 5 實時熒光定量PCR儀由Applied Biosystems（現(xiàn)隸屬于賽默飛Thermo Fisher Scientific）推出，是QuantStudio系列中一款定位于中通量、功能完備、界面友好的定量PCR平臺。該設(shè)備兼具96孔與384孔反應(yīng)模塊的可選性，采用LED光源和先進的光學(xué)檢測系統(tǒng)，可滿足多種常規(guī)核酸檢測與表達分析任務(wù)。

對于采購二手設(shè)備的用戶而言，QuantStudio 5憑借結(jié)構(gòu)緊湊、性能穩(wěn)定、操作軟件直觀等特征，具有較高的再利用價值，在高校實驗室、生物技術(shù)公司及第三方檢測機構(gòu)中仍有較大使用需求。

二、技術(shù)參數(shù)與系統(tǒng)結(jié)構(gòu)

1. 溫控性能

• 模塊類型：標準96孔鋁模塊（0.2 mL 反應(yīng)孔）；

• 升降溫速率：升溫約3.5°C/s，降溫約3.0°C/s；

• 溫控準確性：±0.25°C；

• 溫度均一性：<0.4°C（在90秒保持期內(nèi)）；

• 熱蓋溫度范圍：30°C–105°C，可調(diào)節(jié)壓力以適配不同封膜。

2. 光學(xué)系統(tǒng)

• 激發(fā)光源：高強度LED；

• 檢測方式：多通道熒光檢測系統(tǒng)（最多支持6個通道）；

• 支持染料：FAM™, VIC®, SYBR® Green, ROX™, TAMRA™, JOE™, HEX™等；

• 采集方式：每循環(huán)末實時采集熒光信號，光學(xué)無接觸掃描；

• 校正機制：自動進行熒光漂移和參考染料校正（ROX為推薦參考）。

3. 兼容耗材

• 96孔板（0.2 mL，快裝板或獨立管）；

• 高透明封膜、粘蓋膜、光學(xué)蓋板；

• 建議使用原廠或兼容性測試合格耗材，避免因孔位不一致影響光路。

三、軟件與數(shù)據(jù)處理功能

QuantStudio Design & Analysis 軟件為該系統(tǒng)配套軟件，支持多種實驗設(shè)計和結(jié)果分析模式：

1. 實驗設(shè)置

• 預(yù)設(shè)模板：絕對定量、相對定量、SNP分析、標準曲線、熔解曲線分析等；

• 自定義程序編排：設(shè)置循環(huán)參數(shù)、熒光采集時間點；

• 多用戶賬戶系統(tǒng)，便于管理大型實驗室數(shù)據(jù)權(quán)限。

2. 數(shù)據(jù)分析

• Ct值提取：自動/手動設(shè)定閾值；

• 相對表達分析：支持ΔΔCt法，歸一化目標基因表達；

• SNP判型：通過末端熒光強度判斷基因型；

• 圖形輸出：擴增曲線、熔解曲線、熒光散點圖等可導(dǎo)出圖像。

3. 遠程控制與云平臺

• 通過Thermo Fisher Cloud遠程設(shè)計實驗、監(jiān)控運行狀態(tài)；

• 可實現(xiàn)多臺設(shè)備數(shù)據(jù)集中管理與備份；

• 支持移動設(shè)備端口遠程訪問（部分型號升級后可實現(xiàn)）。

四、常見應(yīng)用方向

QuantStudio 5適用于基礎(chǔ)研究與應(yīng)用檢測的多種核酸實驗：

1. 基因表達分析

• 利用SYBR或TaqMan探針，評估不同處理下的mRNA表達；

• 可對多個目標基因同時檢測，實現(xiàn)相對定量研究。

2. SNP/突變檢測

• 適用于單堿基突變或小范圍結(jié)構(gòu)變異檢測；

• 支持等位基因判型（如AA、AG、GG）；

• 可拓展至個體化醫(yī)學(xué)、疾病篩查研究。

3. 微生物/病毒載量檢測

• 檢測細菌、病毒、支原體等特定病原體DNA/RNA；

• 常用于環(huán)境檢測、疫病篩查和藥效評估。

4. 拷貝數(shù)變異分析（CNV）

• 精確定量染色體片段或特定位點的DNA拷貝數(shù)變化；

• 廣泛用于癌癥、遺傳病等研究。

5. 農(nóng)產(chǎn)品/食品成分檢測

• GMO成分檢測；

• 動植物來源成分識別。

五、二手設(shè)備選購注意事項

購買二手QuantStudio 5系統(tǒng)，應(yīng)從以下維度評估設(shè)備狀態(tài)與價值：

1. 核心部件檢查

• 熱模塊是否升降溫穩(wěn)定（可進行水測試）；

• 光學(xué)通道校準是否準確；

• 是否有報錯或通信中斷記錄；

• 是否可成功運行完整的熒光擴增實驗。

2. 軟件與系統(tǒng)版本

• 是否包含正版授權(quán)的軟件（Design & Analysis）；

• 是否支持最新Win10系統(tǒng)或可升級；

• 云平臺功能是否激活；

• 是否提供完整操作手冊與驅(qū)動包。

3. 外觀與配件

• 主機外殼是否破損、按鍵功能是否失靈；

• 是否提供原廠或合格的96孔模塊；

• 配套的反應(yīng)板托架、封膜壓蓋器是否齊全。

4. 歷史記錄

• 設(shè)備出廠時間與使用年限；

• 是否經(jīng)過正規(guī)授權(quán)商維修；

• 是否有校準與維護記錄；

• 是否經(jīng)過污染清洗和溫控/光學(xué)檢測校準。

六、設(shè)備適配場景評估

作為一款定位于中通量科研與臨床研究的實時熒光PCR平臺，QuantStudio 5適合以下機構(gòu)與用途：

相較全新設(shè)備，二手QuantStudio 5在預(yù)算有限場景下，提供了一種可行解決方案，只要設(shè)備狀態(tài)良好并有可追溯維修記錄，能維持相當水平的實驗性能。

七、結(jié)語

ABI QuantStudio 5 實時定量PCR儀以其可靠的溫控系統(tǒng)、靈敏的熒光檢測機制、便捷的圖形化軟件及良好的通用性，在多種核酸檢測實驗中被廣泛采用。若評估通過，選購二手設(shè)備可在控制成本的同時滿足實驗需求。

在實際購置前，建議要求賣方提供以下資料以作進一步判斷：

• 儀器序列號及出廠年份；

• 運行日志截圖；

• 最近一次擴增實驗的報告；

• 售后服務(wù)與運輸保障條款。