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人白介素8試劑盒技術(shù)原理全解析

來(lái)源:上海乾思生物科技有限公司   2025年05月26日 14:24  
  人白介素8(IL-8)試劑盒主要基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)原理,實(shí)現(xiàn)對(duì)樣本中IL-8的定量檢測(cè)。
  試劑盒采用高親和力的酶標(biāo)板,預(yù)先包被特異性抗人IL-8抗體作為固相抗體。檢測(cè)時(shí),將待測(cè)樣本或標(biāo)準(zhǔn)品加入酶標(biāo)板孔中,樣本中的IL-8會(huì)與固相抗體結(jié)合。經(jīng)過(guò)孵育后,加入生物素化的抗人IL-8檢測(cè)抗體,該抗體與結(jié)合在固相抗體上的IL-8特異性結(jié)合。隨后,加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(SA-HRP),生物素與親和素特異性結(jié)合,形成固相抗體-人IL-8-生物素標(biāo)記抗體-SA-HRP的夾心復(fù)合物。
  未結(jié)合的物質(zhì)通過(guò)洗滌步驟去除,之后加入顯色底物四甲基聯(lián)苯胺(TMB)。在辣根過(guò)氧化物酶的催化下,TMB發(fā)生酶促反應(yīng),產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)。加入終止液后,藍(lán)色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。顏色的深淺與樣本中IL-8的濃度成正比。
  使用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度值(OD值),結(jié)合預(yù)先繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)OD值即可計(jì)算出樣品中IL-8的濃度。該試劑盒具有高靈敏度和特異性,能夠準(zhǔn)確檢測(cè)樣本中微量的IL-8,在炎癥性疾病、腫瘤研究等領(lǐng)域具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。操作過(guò)程中需嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件,確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

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