泛素（Ub）是一種高度保守的8kDa多肽，存在于所有真核細(xì)胞中。它通過三種酶的順序作用與目標(biāo)蛋白的賴氨酸殘基的ε-氨基結(jié)合，這三種酶分別是E1泛素激活酶、E2結(jié)合酶和E3連接酶。此外，泛素本身包含的七個賴氨酸殘基也可以作為泛素的受體，從而形成多泛素鏈。在這些連接方式中，K48和K63連接方式已被充分研究。K48連接的多泛素化會靶向蛋白質(zhì)進(jìn)行蛋白酶體降解，而K63連接則調(diào)節(jié)信號事件、受體內(nèi)吞和免疫反應(yīng)。其他賴氨酸殘基上的多泛素連接則不太顯著，其生理功能仍大多未知。

LifeSensors開發(fā)了VU-1泛素單克隆抗體，能夠識別多泛素化和單泛素化蛋白以及游離泛素。VU-1已被證明可以識別K48、K63、K11連接以及線性泛素鏈；其他連接方式尚未經(jīng)過測試。

艾美捷[干冰]抗泛素單克隆抗體(克隆VU-1)：

貨號：VU-0101-0050  

應(yīng)用：

Western blot（1:1000）請參閱下方協(xié)議。  

ELISA、IHC（1:200–1:500）  

所有應(yīng)用的最佳條件應(yīng)由最終用戶自行確定。  

來源：從雜交瘤上清液中純化。  

亞型：IgG1（小鼠源）  

純度：>90%  

克隆號：VU-1  

提供形式：0.5mg/ml，PBS緩沖液，pH 7.2  

特異性：抗體能夠檢測被多泛素化和單泛素化修飾的蛋白、線性泛素鏈以及游離泛素。由于泛素在真核生物中高度保守，抗體的反應(yīng)性與物種無關(guān)。  

規(guī)格：250ug，足以用于50次以上的Western blot實(shí)驗(yàn)。  

儲存：-20℃保存。避免反復(fù)凍融。

[干冰]抗泛素單克隆抗體(克隆VU-1)圖片：

左圖：Western blot分析鏈特異性和細(xì)胞泛素化偶聯(lián)物，使用單克隆抗體VU-1。（A）K48、K63和K11連接的多泛素化偶聯(lián)物；（B）40µg HEK293T細(xì)胞裂解物（50nM硼替佐米處理）；（C）OLN細(xì)胞未處理（對照）和1µM MG132處理。細(xì)胞裂解物經(jīng)SDS-PAGE分離后，使用VU-1抗體（B.1µg/ml；C.0.2µg/ml）進(jìn)行免疫印跡。

右圖：VU-1單克隆抗體在ELISA中檢測未結(jié)合的泛素。未結(jié)合的泛素被涂覆在聚苯乙烯板上，封閉后與VU-1或FK2抗體（1µg/ml）孵育，隨后加入抗小鼠HRP偶聯(lián)物（1:5000）。加入ECL后，使用Envision平板閱讀器讀取結(jié)果。

文獻(xiàn)參考：

1 Wilkinson, K.D., Regulation of ubiquitin-dependent processes by deubiquitinating enzymes. Faseb J, 1997. 11:1245-56.

2 Meulmeester E, et al Loss of HAUSP-mediated deubiquitination contributes to DNA damage-induced destabilization of Hdmx and Hdm2. Mol Cell.2005 18:565-76.

3 Faustrup H, et al. USP7 counteracts SCFbetaTrCP- but not APCCdh1-mediated proteolysis of Claspin. J Cell Biol. 2009 184:13-9.

4 Li M,et al. Deubiquitination of p53 by HAUSP is an important pathway for p53 stabilization Nature, 2002 416:648-53.

5.Seiberlich V. et.al. The small molecule inhibitor PR-619 of deubiquitinating enzymes affects the microtubule network and causes protein aggregate formation in neural cells: Implications for neurodegenerative diseases. Biochem et Biophys Acta, 2012, 1823;2057-2068.