近年來，類器官技術(shù)為腫瘤研究提供了革命性工具，尤其是腫瘤類器官模型，能夠高度模擬患者腫瘤微環(huán)境，成為藥物篩選、機制研究和個性化醫(yī)療的“明星模型”。

然而，如何成功構(gòu)建腫瘤類器官？哪些細胞因子是核心？濃度如何把控？本文將為你一一揭曉！

腫瘤類器官構(gòu)建流程速覽

樣本獲取：手術(shù)或活檢獲取腫瘤組織，需確保樣本活性（24小時內(nèi)處理最佳）。

組織處理：機械/酶解法解離為單細胞或微小組織塊。

基質(zhì)膠包埋：常用Matrigel或膠原凝膠，模擬細胞外基質(zhì)（ECM）。

培養(yǎng)基配制：基礎(chǔ)培養(yǎng)基（如DMEM/F12）添加關(guān)鍵生長因子、激素及小分子。

培養(yǎng)與傳代：3D培養(yǎng)7-14天，定期觀察形態(tài)并優(yōu)化條件。

常見腫瘤類器官模型及核心細胞因子

不同腫瘤類型需定制化培養(yǎng)方案，以下為5大常見模型的關(guān)鍵參數(shù)：

01結(jié)直腸癌類器官

核心因子：EGF（50 ng/ml）、Wnt3a（100 ng/ml）、Noggin（100 ng/ml）、R-spondin 1（500 ng/ml）。

特殊添加：TGF-β抑制劑（10 μM）或p38抑制劑（1 μM），防止正常細胞過度生長。

02乳腺癌類器官

核心因子：EGF（20 ng/ml）、FGF10（100 ng/ml）、Heregulin（10 ng/ml）。

激素支持：氫化可的松（0.5 μg/ml）、胰島素（5 μg/ml）。

03肺癌類器官

核心因子：FGF7（10 ng/ml）、FGF10（50 ng/ml）、HGF（50 ng/ml）。

關(guān)鍵通路支持：Wnt信號激活劑（3 μM）。

04肝癌類器官

核心因子：HGF（40 ng/ml）、EGF（20 ng/ml）、FGF19（100 ng/ml）。

基質(zhì)支持：高濃度Matrigel（>70%）提升結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。

05胰腺癌類器官

核心因子：EGF（50 ng/ml）、FGF10（100 ng/ml）、Noggin（150 ng/ml）。

特殊需求：需添加Rho激酶抑制劑（10 μM）減少細胞凋亡。

細胞因子的“角色”解析

EGF：促進上皮細胞增殖，濃度通常20-100 ng/ml，過量可能誘導(dǎo)分化。

Wnt3a/R-spondin：維持干細胞自我更新，結(jié)直腸癌模型中濃度較高。

Noggin：抑制BMP通路，防止間質(zhì)細胞污染（濃度50-200 ng/ml）。

HGF/FGF家族：驅(qū)動細胞遷移和血管生成，在轉(zhuǎn)移性腫瘤模型中尤為關(guān)鍵。

避坑指南：構(gòu)建失敗的常見原因

?樣本活性不足：運輸時間過長或消化過度導(dǎo)致細胞死亡。

?細胞因子濃度失衡：過高引發(fā)異常分化，過低則無法支持生長。

?污染風(fēng)險：嚴格無菌操作，添加雙抗（青霉素-鏈霉素）。

?個體化差異：患者來源樣本需優(yōu)化條件，避免“一刀切”。

應(yīng)用場景：從實驗室到臨床

?藥物敏感性檢測：7天內(nèi)評估化療/靶向藥療效，指導(dǎo)臨床用藥。

?基因編輯研究：CRISPR技術(shù)結(jié)合類器官，驗證驅(qū)動基因功能。

?免疫治療平臺：共培養(yǎng)T細胞與類器官，篩選免疫檢查點抑制劑。

逐典生物提供一系列類器官相關(guān)的高質(zhì)量細胞因子，包括Wnt-3a, R-Spondin 1、EGF, Noggin, FGF-7和FGF-10等因子，適用于類器官相關(guān)培養(yǎng)。

逐典類器官細胞因子特點

數(shù)據(jù)展示

重組人催乳素可刺激 Nb2-11 大鼠淋巴瘤細胞的增殖。