試劑簡介

Alexa Fluor 405-Streptavidin是一種結(jié)合了藍色熒光染料（Alexa Fluor 405）與鏈霉親和素（Streptavidin）的生物偶聯(lián)物，應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究中的熒光標(biāo)記、檢測和信號放大。

【Alexa Fluor 405的化學(xué)性質(zhì)與光譜特性】

化學(xué)結(jié)構(gòu)

Alexa Fluor 405的核心結(jié)構(gòu)包含磺酸基團（-OSO??）、苯環(huán)、哌啶環(huán)及環(huán)己烯酮基團，并通過琥珀酰亞胺酯（NHS ester）實現(xiàn)與蛋白的偶聯(lián)。其分子中帶有三個三乙胺（Et?NH?）離子，增強了水溶性和穩(wěn)定性。

光學(xué)特性

激發(fā)與發(fā)射波長：激發(fā)峰（Ex）為400–402 nm，發(fā)射峰（Em）為420–424 nm。

摩爾吸收系數(shù)：ε = 35,000 L·mol?1·cm?1，表明其吸光能力強。

斯托克斯位移：約20 nm（如Ex 401 nm，Em 422 nm），有助于減少背景干擾。

熒光壽命：約1.6 ns，適合時間分辨熒光檢測。

優(yōu)勢

相比UV激發(fā)的藍色染料（如Cascade Blue），Alexa Fluor 405可在可見光（405 nm激光）下激發(fā)，減少自體熒光干擾，信號較亮。

與綠色熒光染料（如FITC）光譜重疊小，適合多色標(biāo)記實驗。

Streptavidin的結(jié)構(gòu)與特性

四聚體蛋白：分子量約52–66 kDa，由四個相同亞基組成，每個亞基可結(jié)合一個生物素分子。

較高親和力：與生物素的解離常數(shù)（Kd）為10?1? M，是已知較強的非共價相互作用之一。

穩(wěn)定性：耐受pH（4–10）、高溫（70℃以下）及有機溶劑，適合多種實驗條件。

【補充信息】

狀態(tài)：凍干粉

純度：≥95%

儲存條件：-20℃避光干燥保存，有效期 6 個月。

復(fù)溶后溶液：需添加0.2 mM 硫柳汞防腐，4℃避光保存 6 個月；長期儲存建議分裝后-20℃冷凍，避免反復(fù)凍融。

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