CHO-PEG-N3是一種雙功能化聚乙二醇衍生物，其一端為醛基（CHO），另一端為疊氮基團（N3）。其合成通常采用兩步法：首先通過甲氧基聚乙二醇（mPEG-OH）與對甲苯磺酰氯（TsCl）反應(yīng)生成活性中間體mPEG-OTs，再分別引入醛基和疊氮基團。

合成工藝優(yōu)化

第一步反應(yīng)中，mPEG-OH與TsCl的摩爾比、反應(yīng)溫度（通常為60-80℃）和溶劑（如二氯甲烷）的選擇對產(chǎn)率影響顯著。研究表明，當(dāng)摩爾比為1:1.2、反應(yīng)溫度為70℃時，mPEG-OTs的產(chǎn)率可達92%。第二步反應(yīng)中，mPEG-OTs與水合肼反應(yīng)生成mPEG-NH?，再通過氧化反應(yīng)（如使用高碘酸鈉）引入醛基，同時通過（NaN?）取代反應(yīng)生成疊氮基團。

生物正交反應(yīng)機制

CHO-PEG-N3的醛基可通過希夫堿反應(yīng)與氨基化合物共價結(jié)合，而疊氮基團則參與無銅點擊化學(xué)（如應(yīng)變促進的炔-疊氮環(huán)加成反應(yīng)，SPAAC）。實驗證明，在pH 5.0條件下，CHO-PEG-N3與賴氨酸修飾的熒光探針（如FITC-Lys）反應(yīng)速率常數(shù)達0.85 M?1s?1，生成的亞胺鍵在生理條件下穩(wěn)定。此外，疊氮基團與炔烴的環(huán)加成反應(yīng)可在10分鐘內(nèi)完成，產(chǎn)率超過90%，且無需銅催化劑，避免了重金屬毒性問題。

生物標(biāo)記應(yīng)用

CHO-PEG-N3在生物標(biāo)記領(lǐng)域展現(xiàn)出優(yōu)勢。例如，將其醛基與細(xì)胞膜蛋白的氨基反應(yīng)，疊氮基團再與炔烴修飾的量子點結(jié)合，可實現(xiàn)細(xì)胞表面蛋白的高通量標(biāo)記。在活細(xì)胞成像中，該策略的標(biāo)記效率比傳統(tǒng)方法提高2.5倍，且細(xì)胞存活率保持在90%以上。

結(jié)論：CHO-PEG-N3的雙重反應(yīng)活性使其成為生物標(biāo)記與材料表面修飾的理想工具，尤其適用于需要溫和條件的生物正交反應(yīng)。

供應(yīng)商：重慶渝偲醫(yī)藥科技有限公司