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- 產(chǎn) 地:
- 暫無(wú)
- 所在地區(qū):
- 福建廈門(mén)市
干擾/敲除慢病毒(三保一)價(jià)格:5998元
過(guò)表達(dá)慢病毒價(jià)格:2800元起
服務(wù)優(yōu)勢(shì)
1、更多準(zhǔn)現(xiàn)貨最快1-2周交付1ml,高滴度病毒
2、病毒穿梭載體齊全,各種標(biāo)簽和啟子PEG,高速,層析等多種純化方式
3、完善的快速的售后體系,解決后顧之憂(yōu),不成功不收任何費(fèi)用
4、病毒使用無(wú)憂(yōu),保證蛋白水平明顯變化
慢病毒使用說(shuō)明
準(zhǔn)備貼壁細(xì)胞:第1天,在24孔培養(yǎng)板(以此為例)接種若干孔,每個(gè)孔內(nèi)接種3~5×10的4次方個(gè)目的細(xì)胞,以便進(jìn)行病毒感染時(shí)細(xì)胞的融合度約為70%。
第2天,觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如細(xì)胞狀態(tài)較好則開(kāi)始侵染。
病毒侵染:取出-80C的儲(chǔ)存的病毒,在冰上融化后,瞬時(shí)離心。使用含血清、不含抗生素的培養(yǎng)基,根據(jù)MOI配制慢病毒稀釋液(可設(shè)置不同MOI)。根據(jù)需要添加Polybrene,添加時(shí)需要設(shè)置合適的濃度吸去原細(xì)胞培養(yǎng)器皿中的培養(yǎng)基,添加配制好的慢病毒稀釋液?;靹蚝蠓庞诙趸寂囵B(yǎng)箱(37°C、5%的二氧化碳)孵育過(guò)夜。
去除病毒:第3天,更換培養(yǎng)液。一般在24小時(shí)候內(nèi)將含有慢病毒的培養(yǎng)液更換成正常培養(yǎng)液;如果侵染對(duì)細(xì)胞有明顯毒性作用而影響細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),可以在8-12小時(shí)更換培養(yǎng)液。
檢測(cè)結(jié)果:第4天,帶熒光標(biāo)簽的慢病毒可通過(guò)倒置熒光顯微鏡進(jìn)行侵染效果評(píng)估;帶螢火蟲(chóng)熒光素酶標(biāo)簽的病毒可通過(guò)熒光素酶實(shí)驗(yàn)進(jìn)行侵染效果評(píng)估:也可通過(guò)qPCR或WB進(jìn)行侵染效果評(píng)估。
漠寶(廈門(mén))生物科技有限公司
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