簡(jiǎn)介：

PicoGreen dsDNA定量試劑是一種特異性結(jié)合雙鏈DNA （dsDNA）的飽和熒光染料，激發(fā)波長(zhǎng)為480 nm，發(fā)射波長(zhǎng)為520 nm，與大多數(shù)熒光計(jì)和熒光酶標(biāo)儀兼容。PicoGreen僅與dsDNA結(jié)合后才發(fā)出熒光，不受核苷酸和單鏈核酸的影響，產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度與dsDNA濃度成正比，且無序列依賴性，非常適合于dsDNA的定量檢測(cè)，可檢出25 pg/ml~1 μg/ml濃度范圍內(nèi)的dsDNA。PicoGreen dsDNA定量試劑有以下優(yōu)勢(shì)：1 靈敏度高：可檢測(cè)低至200 pg的dsDNA，節(jié)省寶貴樣品；2 特異性強(qiáng)：在等摩爾的RNA存在的條件下，對(duì)dsDNA具有特異性；3 耐受性好：耐受較高濃度的鹽、尿素、乙醇、氯仿、去垢劑、蛋白或瓊脂糖，可以直接定量PCR擴(kuò)增產(chǎn)物而無需從反應(yīng)混合物中純化DNA。4 易于使用——只需在樣品中加入染料，等待5分鐘，然后讀數(shù)即可，且適用于96和384孔板；與大多數(shù)基于熒光的酶標(biāo)儀和熒光計(jì)兼容。5 適用范圍廣：可適用于PCR的分析、芯片樣品、DNA損傷分析、酶活分析、基因組DNA定量以及復(fù)雜混合物中dsDNA的檢測(cè)和病毒DNA定量等多種領(lǐng)域。

一．染料工作液的配置 PicoGreen dsDNA定量試劑取出后回溫至室溫，該試劑是以100 µL 200×的濃縮液形式保存于無水DMSO中的。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天，根據(jù)實(shí)驗(yàn)用量用1×TE（10 mM Tris-HCl，1 mM EDTA，pH 7.5）按1:200 的比例稀釋PicoGreen濃縮液。

注意事項(xiàng)：

1 由于試劑容易吸附到玻璃表面，要在塑料容器中配制。

2 PicoGreen試劑見光易降解，所以應(yīng)將配好的溶液用鋁箔包住或放置暗處避光保存。

3 溶液最好在配制好數(shù)小時(shí)內(nèi)使用，以保證優(yōu)良結(jié)果。