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上海研生實業(yè)有限公司

胚胎成纖維細(xì)胞,沙眼衣原體PCR檢測試劑盒

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線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)測試盒

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  • 上海研生實業(yè)有限公司
  • 360元(具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn))
  • 2024-09-02 20:13:22
  • 上海市
  • 國產(chǎn)
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我要詢價

【簡單介紹】

品牌 其他品牌 貨號 YSH3486
規(guī)格 100管/96樣 供貨周期 現(xiàn)貨
主要用途 僅供科研研究實驗 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)測試盒包括超氧自由基、過氧化氫、及其下游產(chǎn)物過氧化物和羥化物等,研究表明,機體95%以上的活性氧(ROS)都來自于線粒體,其失衡所致的氧化應(yīng)激與細(xì)胞生長增殖、發(fā)育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過程有關(guān)。

【詳細(xì)說明】

線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)測試盒

商品詳情:
測定意義:                          

活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、過氧化氫、及其下游產(chǎn)物過氧化物和羥化物等,研究表明,機體95%以上的活性氧(ROS)都來自于線粒體,其失衡所致的氧化應(yīng)激與細(xì)胞生長增殖、發(fā)育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過程有關(guān)。

正常情況下,細(xì)胞內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)與氧自由基處于平衡狀態(tài),細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平維持在較低的生理范圍;在病理情況下,細(xì)胞內(nèi)抗氧化系統(tǒng)與氧自由基的平衡被打破,細(xì)胞內(nèi)活性氧水平過多?茀?

貨號

規(guī)格

檢測方法

YSH3486

100管/96樣

熒光法

測定原理:

熒光探針-還原型二氯熒光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可擴散通過線粒體膜,在線粒體內(nèi)被酯酶水解,形成無熒光的DCFH,DCFH迅速與ROS反應(yīng)生成熒光物—氧化型二氯熒光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF)。 根據(jù)上述測定原理設(shè)計了利用熒光法直接定量檢測線粒體ROS產(chǎn)生速率的方法。將熒光強度隨時間變化的數(shù)據(jù)點擬合,線性回歸直線斜率與ROS產(chǎn)生的速率呈正比。

需自備的儀器和用品:

多功?茀?
樣品中AA提?。?/span>

1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

3.血清等液體:直接檢測。

計算公式如下:

1、血清(漿)LAP活力的計算:

單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計算:

1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算:

單位的定義:每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬。

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線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)測試盒共價結(jié)合型果膠(CSP)含量測試盒50管/24樣 可見分光光度法

原果膠含量測試盒100管/48樣 微量法

原果膠含量測試盒50管/24樣 可見分光光度法

半乳糖醛含量測試盒100管/96樣 微量法

半乳糖醛含量測試盒50管/48樣 可見分光光度法

果膠甲酯化程度測試盒100管/96樣 微量法

果膠甲酯化程度測試盒50管/48樣 可見分光光度法

果膠酶測試盒100管/48樣 微量法

果膠酶測試盒50管/24樣 可見分光光度法
注意事項:

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個樣做預(yù)實驗,如果測定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4.檢出限為100μmol/L。


    
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