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單克隆抗體的基本原理和過程通過細胞融合技術將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,所產(chǎn)生的融合細胞既具有親本骨髓瘤細胞的無限繁殖的生物學特性,又具有另一親本B淋巴細胞合成、分泌特異性抗體的能力。應用此技術從一個抗體分泌性B細胞雜交瘤分裂增殖,形成一個大的細胞克隆。由B細胞雜交瘤細胞克隆產(chǎn)生的只識別抗原分子上某一個抗原決定簇的純抗體,即單克隆抗體。單克隆抗體具有純度高、特異性強、利于實驗標準化即可大量生產(chǎn)供應等特點。在單克隆抗體制備中,雖然除小鼠外其它動物也可用于制備雜交瘤,但本書以小鼠為例來說明有關技術,
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PEI轉染手冊轉染操作流程:1、細胞傳代:轉染前24h內分離293T細胞至含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基中進行傳代培養(yǎng),接種密度如下:6孔板:0.5x106細胞10cm培養(yǎng)皿:4.0x106細胞15cm培養(yǎng)皿:9.0x106細胞2、轉染轉染前將所有試劑置于室溫。2.1質粒DNA的稀釋在無菌試管中,用無血清的DMEMW/O酚紅培養(yǎng)基(濃度為10%)稀釋質粒DNA(ug)。病毒包裝體(psPAX2):病毒包膜(pMD2G)和重組質粒DNA的稀釋比例分別為4:2:1。6孔板:200ul+3ug的DN
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11、如何才能充分脫蠟?(1)蠟不溶于水,如果脫蠟不干凈,少許蠟存留于切片上,將會引起染色不均勻、陽性物時隱時現(xiàn)、真假難辨、背景染色增加等。為了解決上述的問題,切片在染色前必須*脫蠟,目前用于脫蠟的試劑主要是二甲苯,因它脫蠟力強,脫蠟時間較短;(2)脫蠟的時間要根據(jù)季節(jié),室溫和試劑的新鮮謀面是在不同。如果在夏天,室溫較高,脫蠟試劑也新鮮,則脫蠟時間不需很多,3-5分鐘就已足夠。如果在冬天,室溫較低,脫蠟試劑也較陳舊,則脫蠟時間需要延長,10-20分鐘或更長。(3)當天切的切片,燒烤2小時后進行染
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40065516781、石蠟切片和冰凍切片的比較?(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片。因為作石蠟切片時要高溫烤片,可能會破壞組織的抗原性,如果組織的抗原性較穩(wěn)定,則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片。(2)冰凍切片的優(yōu)點是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性,做免疫組化時不需抗原修復這一步。缺點是細胞內易形成冰晶而破壞細胞結構,可能會使抗原彌散;切片厚度較石蠟的厚,做的片子沒石蠟的漂亮。當你買一抗時,目錄上都寫著做什么樣的切片,如果它寫著只能做冰凍,就不能做石蠟,如寫著兩者都可,
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代理商名稱:Bangslabs:http://www.bangslabs.com標準微球我們可以提供2000多種各式微球。其密度從0.9至2.3g/cm3不等。產(chǎn)品為膠體,懸浮液或是沉淀物形式。通常產(chǎn)品以質量為銷售單位。其質量百分比一般為10%。直徑跨度大(從納米級到毫米級均可以提供)。我們可以提供~0.020-1000μm(20nm-1mm)范圍內的微球.其粒徑的質控方法一般為透射電鏡法(TEM),有時還會輔以掃描電鏡(SEM)。對二氧化硅微球而言,(動態(tài)光散射法),光學顯微鏡檢測是*的,以保
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一般來講,耦聯(lián)到二抗上的探針主要有酶(辣根過氧化酶HRP和堿性磷酸酶AP或其衍生物APAAP,PAP),熒光基團(FITC,RRX,TR,PE,Rhodamine)和生物素。選用哪種探針的二抗主要取決于具體的實驗。對于WesternBlot和ELISA,zui常用的二抗是酶標二抗;而細胞或組織標記實驗(細胞免疫化學,組織免疫化學,流式細胞術)中通常使用熒光標記的二抗。如果想要更大程度的放大檢測信號,可以使用Biotin/Avidin檢測系統(tǒng)。其中熒光素是具有光致熒光特性的染料,熒光染料種類很多,
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SantaCruz公司產(chǎn)品Protocols及相關支持產(chǎn)品SantaCruz生物技術公司為*抗體提供了高品質的支持產(chǎn)品。包括用于WB和IHC的自產(chǎn)的第二抗體,用于IP研究的發(fā)光試劑,瓊脂糖標記proteinA,proteinGPLUS和proteinL,用于WB的胞核提取,全細胞溶解物,組織提取試劑,WB膜,TransCruz凝膠遷移寡核苷酸,封閉物和實驗室常用試劑。提供用于WB的CruzMarkerTM分子量標準和預染分子量標準。ImmunoCruz染色系統(tǒng)用于IHC(石蠟切片)染色,為預稀釋
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起福生物代理品牌4006551678美國GeneCopoeiaInc.專注基因克隆領域十多年,擁有多項美國技術,是*zui大的基因克隆供應商之一,NCBI推薦基因克隆供應商之一。公司可提供40,000多個人源、小鼠、斑馬魚基因的cDNA和ORF克隆,miRNA前體表達克隆和miRNA靶標克隆以及shRNA克隆,同時提供完善的基因表達檢測產(chǎn)品和蛋白技術服務平臺,為廣大科研客戶提供zui完整的基因研究各階段實驗材料和解決方案。labvision是免疫組織化學產(chǎn)品領域品牌,在該領域具有*的聲譽。該公司