生長(zhǎng)特性

貼壁  上皮樣

培養(yǎng)條件

培養(yǎng)基：ENDOTHELIAL CELL MEDIUM(Sciencell,1001)

溫度：37℃     氣相：95%空氣,5% CO2

傳代

1. 用75%酒精噴灑整個(gè)培養(yǎng)瓶消毒，將其平躺置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行1-2小時(shí)的緩沖，.然后置于無(wú)菌操作臺(tái)，打開瓶口，將其中的培養(yǎng)液去掉，再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基(以T25培養(yǎng)瓶為例)并置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀況及培養(yǎng)基顏色變化對(duì)其進(jìn)行換液以及傳代，一般2到3天換一次液；

2.待細(xì)胞長(zhǎng)至80-90%時(shí)，需要對(duì)其進(jìn)行傳代，推薦傳代比例為1:3至1:4 ；

3傳代步驟：將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°預(yù)熱，倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，往培養(yǎng)瓶中加入3-5 ml PBS，輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1 ml預(yù)熱好的胰酶，置于37°孵育消化（*次消化需時(shí)常取出置于顯微鏡下觀察，以顯微鏡下細(xì)胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細(xì)胞脫落為佳消化時(shí)間，記錄佳消化時(shí)間，以便于下次消化），消化好后加入3ml*培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞，使之*脫落，然后收集細(xì)胞懸液，1200rpm離心5min，棄上清，加入*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，進(jìn)行傳代。

保存

凍存條件：80%*培養(yǎng)基+10%FBS+10%DMSO

(備注：建議使用本公司的冷凍液（H-W-100），用4度保存的冷凍液直接重懸細(xì)胞，不能預(yù)熱后使用。)

保存條件：液氮存儲(chǔ)

供應(yīng)限制

僅供研究之用

常見問(wèn)題及解決方案

1.培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細(xì)胞極大可能會(huì)污染，所以我們會(huì)及時(shí)安排幫老師解決。

2.收到細(xì)胞后盡快更換為含新鮮培養(yǎng)基，不可使用瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)基

3.細(xì)胞漂浮：培養(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。1-2小時(shí)后觀察，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底，表明細(xì)胞活力正常，剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉，留8-10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合度80%，進(jìn)行消化傳代；如細(xì)胞還是不貼壁，將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo)，直到問(wèn)題解決。

Mcf-7/ADR

人乳腺癌阿霉素耐藥細(xì)胞株

1640+10%FBS+1%P/S+500ng/ml ADR

K562/ADR

人慢性骨髓性白血病耐藥細(xì)胞株

1640+10%FBS+1%P/S+1ug/ml ADR

SGC-7901/DDP

人胃癌細(xì)胞順鉑耐藥株

1640+10%FBS+1%P/S+1ug/ml DDP

HeLa/DDP

人宮頸癌細(xì)胞順鉑耐藥株

1640+10%FBS+1%P/S+1ug/ml DDP

PC-9/GR

人肺腺癌細(xì)胞吉非替尼耐藥株

H9c2(2-1)

大鼠胚胎心肌細(xì)胞

DMEM+10% FBS

A7r5

大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

DMEM+10% FBS

PC-12(高分化)

大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化)

RPMI-1640+10% FBS

C6

大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞

F-12K+10% FBS

RLE-6TN

大鼠肺泡Ⅱ型細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

BRL 3A

大鼠正常肝細(xì)胞

DMEM+10% FBS

NRK-52E

大鼠腎小管導(dǎo)管上皮細(xì)胞

DMEM+10% FBS

IEC-6

大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞

DMEM+10% FBS+0.1u/ml insulin

RBL-2H3

大鼠嗜堿性白血病細(xì)胞

DMEM+15%熱滅活FBS

UMR-106

大鼠骨肉瘤細(xì)胞

DMEM+10% FBS

RSC96

大鼠雪旺細(xì)胞

DMEM+10% FBS

NR8383

大鼠肺泡巨噬細(xì)胞

F12K+15%FBS（熱滅活）+2 mM L-谷氨酰胺

HBZY-1

大鼠腎小球系膜細(xì)胞

DMEM+10% FBS

MDA-MB-231-GFP

人乳腺癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

DMEM+10% FBS

MDA-MB-468-RED

人乳腺癌細(xì)胞-紅色標(biāo)記

L15 +10%FBS

CNE1-LUC

人鼻咽癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

RPMI-1640+10% FBS

MCF7-GFP

人乳腺癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

DMEM+10% FBS

HELA-GFP

人宮頸癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

DMEM+10% FBS

B16-F10--RED

小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞-紅色標(biāo)記

RPMI-1640+10% FBS

4T1-LUC

小鼠乳腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

RPMI-1640+10% FBS

SK-MEL-2-LUC

人皮膚黑色素瘤細(xì)胞熒光標(biāo)記

MEM+10% FBS

MDA-MB-231

人乳腺癌細(xì)胞

DMEM+10% FBS

SPC-A-1

人肺癌細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

Eca-109

人食管癌細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

THP-1

人髓系白血病單核細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

K562

人慢性骨髓性白血病細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

PC-3

人前列腺癌細(xì)胞

F-12K+10% FBS

A549

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

F-12K+10% FBS

NCM460

人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

HCT-15

人結(jié)腸癌細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

COLO 320DM

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

COLO 320

人結(jié)腸癌細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

COLO 201

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

Caco-2

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

DMEM+20% FBS

BEAS-2B

人支氣管上皮細(xì)胞

DMEM+10% FBS

Raji

人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

Daudi

人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

RAMOS

人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

T84

人結(jié)腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞

DMEM/F12+10% FBS

c666-1

人鼻咽癌細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

HepG2.2.15

表達(dá)HBV病毒的人肝癌細(xì)胞

MEM+10% FBS+0.4mg/ml G418

T47D

人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

SK-BR-3

人乳腺癌細(xì)胞

DMEM（高糖）+10% FBS

HT-29

人結(jié)腸癌細(xì)胞

McCoy’s 5A+10% FBS

PLC/PRF/5

人肝癌亞力山大細(xì)胞

DMEM+10% FBS

L-02（HL-7702)

人正常肝細(xì)胞

RPMI-1640+20% FBS

SGC-7901

人胃癌細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

786-O

人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

MDCK(NBL-2)

犬腎細(xì)胞

DMEM+10% FBS

UMNSAH/DF-1

雞胚胎成纖維細(xì)胞

DMEM+10% FBS

CHO-K1

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞

F12K+10%FBS

COS-7

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞

DMEM+10%FBS

ST

豬睪丸細(xì)胞

MEM+10% FBS

CHL

中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞

DMEM+10%FBS

PK-15

豬腎細(xì)胞

MEM+10% FBS

VERO

非洲綠猴腎細(xì)胞

DMEM+10%FBS

PT-K75

豬鼻甲黏膜成纖維細(xì)胞

DMEM+10%FBS

NIH/3T3

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

DMEM+10% FBS

B16

小鼠黑色素瘤細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

U14

小鼠宮頸癌細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

4T1

小鼠乳腺癌細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

L5178Y TK+/- clone (3.7.2C)

小鼠淋巴瘤細(xì)胞

DMEM+10% FBS

C2C12

小鼠成肌細(xì)胞

DMEM+10% FBS

Bend.3

小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

DMEM+10% FBS

Min6

小鼠胰島β細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

J774A.1

小鼠單核巨噬細(xì)胞

DMEM+10% FBS

H22

小鼠肝癌細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

ID8

小鼠卵巢癌細(xì)胞

DMEM+10% FBS

GC-2spd

小鼠精母細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

DC2.4

小鼠樹突狀細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

NIT-1

小鼠胰島素瘤β細(xì)胞

F-12K+10%FBS

EL4

小鼠淋巴瘤細(xì)胞

DMEM+10% HS 馬血清

TM4

小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞

DMEM/F12+10% FBS

BV2

小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞

DMEM/F12+10% FBS

RAW264.7

小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞

DMEM + 10% FBS

3T3-L1

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

DMEM+10% CS

HT22

小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞

DMEM+10% FBS

Pan02

小鼠胰腺癌細(xì)胞

RPMI-1640+10% FBS

MC3T3-E1  Subclone 14

小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14

MEMα +10% FBS