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免疫球蛋白G（IgG）——模擬抗體活性，神似抗體結(jié)構(gòu)免疫球蛋白免疫球蛋白（Ig）指具有抗體（Ab）活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)，與抗體分子相似的球蛋白。免疫球蛋白是由兩條相同的輕鏈和兩條相同的重鏈通過(guò)鏈間二硫鍵連接而成的四肽鏈結(jié)構(gòu)。免疫球蛋白分為五類，即免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白D（IgD）和免疫球蛋白E（IgE）。圖1五類免疫球蛋白結(jié)構(gòu)示意圖IgG簡(jiǎn)介免疫球蛋白G（ImmunoglobulinG，IgG）是血清中免疫球蛋白主成分，約占血清中免疫球蛋白總
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qPCR常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案對(duì)于從事分子生物學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)猿來(lái)說(shuō)，RT-qPCR實(shí)驗(yàn)可謂是老生常談了?？此骑L(fēng)平浪靜，只需“RNA提取-反轉(zhuǎn)錄-熒光定量”這些按部就班的操作，實(shí)則險(xiǎn)象環(huán)生，一丁點(diǎn)的出錯(cuò)都有可能讓我們懷疑人生。即便如此，在CNS的召喚下我們?nèi)耘f一遍遍的重復(fù)、重復(fù)、再重復(fù)。小翊深有體會(huì)，為此嘔心瀝血整理出來(lái)常用的SYBRGreen染料法RT-qPCR實(shí)驗(yàn)的幾個(gè)常見(jiàn)問(wèn)題，并給出了可能的原因和解決方案，希望大家能夠順利度過(guò)RT-qPCR大關(guān)。RT-qPCR實(shí)驗(yàn)中，大家或多或少會(huì)遇到擴(kuò)增曲線異常
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抗體親和純化系列產(chǎn)品概述ProteinA、ProteinG是常應(yīng)用于抗體親和純化和免疫沉淀的蛋白。將ProteinA、G分別固定在不同的介質(zhì)上，或同時(shí)將ProteinA、G共價(jià)偶聯(lián)到介質(zhì)表面，是從腹水、細(xì)胞培養(yǎng)物上清和血清中分離IgG和IgG亞家族的有效工具。ProteinL源于細(xì)菌，能更廣泛地結(jié)合各種類型以及亞類的免疫球蛋白，包括所有類型的IgG和單鏈可變區(qū)(ScFv)以及Fab片段。該蛋白只與抗體的kappa鏈結(jié)合而不會(huì)影響抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)，這一特性使其與蛋白A或蛋白G相比，能更廣泛地結(jié)合
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Hifair Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR （gDNA digester plus）
Hifair®Ⅲ1stStrandcDNASynthesisSuperMixforqPCR(gDNAdigesterplus)——Yeasen第三代逆轉(zhuǎn)錄酶預(yù)混液，高質(zhì)量cDNA的*！研發(fā)背景RT-qPCR是一個(gè)多步驟連貫實(shí)驗(yàn)，逆轉(zhuǎn)錄的實(shí)驗(yàn)結(jié)果只能通過(guò)后續(xù)qPCR進(jìn)行判定，因此這一過(guò)程的成功與否十分關(guān)鍵。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，你是否有遇到過(guò)這些問(wèn)題？1.逆轉(zhuǎn)錄效率低導(dǎo)致后續(xù)qPCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果Ct值偏大？2.RNA具有復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)或GC含量高導(dǎo)致逆轉(zhuǎn)錄失??？3.逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)品組分多，加樣麻煩誤差還大？。。。。。。 -
【干貨+試用】一文get核酸片段化酶知識(shí)要點(diǎn)近小翊在后臺(tái)收到一封留言，說(shuō)建庫(kù)的片段化儀器壞了，不能做超聲打斷，問(wèn)有沒(méi)有其他核酸打斷的方法推薦。核酸打斷的方法可以分為機(jī)器法和試劑法。其中機(jī)器法包含接觸式和非接觸式，接觸式主要包括探頭式和水浴超聲兩大類，這類方法比較實(shí)惠，但是直接接觸樣本會(huì)導(dǎo)致樣本損耗和污染，非接觸式主要包括Diagennode和Covaris這兩個(gè)品牌，這類儀器和耗材的成本太高，單個(gè)樣本的耗材成本達(dá)20-50元。試劑法指的是采用片段化酶對(duì)核酸進(jìn)行打斷，這類方法成本較低，操作簡(jiǎn)便省時(shí)
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搞事情，翊圣請(qǐng)來(lái)了四位ECL超級(jí)魔術(shù)師？
搞事情啊，翊圣請(qǐng)來(lái)了四位ECL超級(jí)魔術(shù)師？？老板，都說(shuō)你家ECL功能強(qiáng)，我給個(gè)飛克級(jí)的蛋白，能變出條帶嗎？辦不到？？老板，我多給點(diǎn)小費(fèi)，把蛋白提高到皮克級(jí)，能不能變出條帶？還是辦不到？？那也太差勁了，還想不想混了！不，小伙，你理解錯(cuò)了，是通通不是問(wèn)題??！跟著我往下看！點(diǎn)亮您的印跡膜，一觸即發(fā)ECL試劑，即化學(xué)發(fā)光法辣根過(guò)氧化物酶（HRP）底物，是目前Westernblotting檢測(cè)中為靈敏的試劑。目前市場(chǎng)上普通ECL試劑在使用過(guò)程中經(jīng)常出現(xiàn)易淬滅、高背景、不穩(wěn)定以及低豐度蛋白難以檢測(cè)等問(wèn)題，影 -
化繁為簡(jiǎn)！小翊帶你輕松搞定qPCR數(shù)據(jù)分析熒光定量PCR（qPCR）是實(shí)驗(yàn)室常用的一種技術(shù)，該技術(shù)可以應(yīng)用于基因表達(dá)分析、基因分型、病原體檢測(cè)、SNP分析等。qPCR實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單，原理易懂，但面對(duì)一堆凌亂的數(shù)據(jù)，如何進(jìn)行結(jié)果分析成了頭疼的問(wèn)題，今天小翊將帶你學(xué)會(huì)如何化繁為簡(jiǎn)，輕松獲得可以發(fā)表SCI的數(shù)據(jù)！qPCR常用的分析方法有相對(duì)定量和定量，需根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行選擇。本期我們關(guān)注的是qPCR常見(jiàn)的應(yīng)用—基因表達(dá)分析，一般選擇相對(duì)定量法。1.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)假設(shè)目前需要研究光誘導(dǎo)對(duì)擬南芥AtSUC2
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鏈霉親和素系列專題——一品多用，實(shí)現(xiàn)大價(jià)值一背景介紹鏈霉親和素是一種來(lái)源于阿維丁鏈霉菌（streptomycesavidinii）的生物素結(jié)合蛋白質(zhì)，其非特異性結(jié)合遠(yuǎn)比親和素低，且與蛋清親和素在中性pH值具有凈正電荷和包含大約7%的碳水化合物相比，鏈霉親和素蛋白具有在中性pH值幾乎沒(méi)有凈電荷，不含有碳水化合物等更有利的化學(xué)性質(zhì)，所以它被廣泛用來(lái)作為抗生物素蛋白的替代品。二產(chǎn)品特點(diǎn)四聚體結(jié)構(gòu)：鏈霉親和素同源四聚體的形式存在，大小為66Kda；親和力強(qiáng)：每分子鏈霉親和素可以高度特異性地與四分子生物素
