13
SDF-1a ELISA
SDF-1a ELISA即基質(zhì)細胞衍生因子 - 1α（Stromal Cell Derived Factor-1α）的酶聯(lián)免疫吸附測定技術(shù)，在基礎(chǔ)醫(yī)學研究、臨床診斷及藥物研發(fā)等領(lǐng)域有著不可忽視的地位。
SDF-1α，也被稱為 CXCL12，是一種屬于 CXC 趨化因子家族的小分子細胞因子。它在機體的多個生理過程中扮演關(guān)鍵角色，比如胚胎發(fā)育期間細胞的遷移與歸巢、造血干細胞的維持與動員，以及免疫系統(tǒng)的正常運作等。在病理狀態(tài)下，SDF-1α 的表達與活性變化和多種疾病緊密相關(guān)，像腫瘤的轉(zhuǎn)移、炎癥性疾病的進展，以及心血管疾病的發(fā)生發(fā)展等。
SDF-1α ELISA 試劑盒大多采用雙抗體夾心法原理。試劑盒的核心組件包括已包被抗 SDF-1α 抗體的微孔板，這是捕獲樣本中 SDF-1α 的基礎(chǔ)；一系列不同濃度的 SDF-1α 標準品，用于構(gòu)建標準曲線，從而實現(xiàn)對樣本中 SDF-1α 的精確含量測定；酶標抗 SDF-1α 抗體，其作用是與已結(jié)合在固相抗體上的 SDF-1α 進一步結(jié)合，形成穩(wěn)固的 “固相抗體 - SDF-1α - 酶標抗體" 夾心結(jié)構(gòu)；顯色劑，常見如四甲基聯(lián)苯胺（TMB），在酶的催化下發(fā)生顯色反應，其顏色變化程度與樣本中 SDF-1α 的含量成正比；終止液，用于終止顯色反應；還有各類緩沖液，保證整個檢測反應在合適的環(huán)境中進行。
在實際檢測操作時，首先將經(jīng)過妥善處理的待測樣本（例如血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等）以及 SDF-1α 標準品加入到包被有抗 SDF-1α 抗體的微孔板孔內(nèi)。樣本中的 SDF-1α 會與固相化在微孔板表面的抗體特異性結(jié)合。接著加入酶標抗 SDF-1α 抗體，完成夾心結(jié)構(gòu)的構(gòu)建。隨后，通過多次使用洗滌緩沖液對微孔板進行洗滌，徹di去除未結(jié)合的物質(zhì)，以避免非特異性反應干擾檢測結(jié)果。之后加入顯色劑 TMB，在酶標抗體中酶的催化作用下，TMB 逐漸顯色，隨著時間推移顏色不斷加深。當顯色達到優(yōu)良狀態(tài)時，加入終止液，溶液顏色會立即發(fā)生明顯變化（如從藍色變?yōu)辄S色）。最后，運用酶標儀在特定波長（一般為 450nm）下測定各孔的吸光度（OD 值）。將樣本的 OD 值與預先繪制好的標準曲線相對比，就能精準計算出樣本中 SDF-1α 的濃度。
SDF-1α ELISA 技術(shù)具有靈敏度高的優(yōu)勢，能夠檢測出樣本中極微量的 SDF-1α。其特異性強，能準確識別 SDF-1α，減少與其他相似物質(zhì)的交叉反應，確保檢測結(jié)果的可靠性。而且該技術(shù)重復性好，不同批次檢測結(jié)果的一致性高，為科研人員深入探究 SDF-1α 在生理和病理過程中的作用機制提供了有力工具，也有助于臨床醫(yī)生對相關(guān)疾病進行早期診斷、病情監(jiān)測以及治療效果評估，在藥物研發(fā)過程中還可用于評估藥物對 SDF-1α 相關(guān)通路的影響。
