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SDH ELISA
SDH ELISA，即琥珀酸脫氫酶（Succinate Dehydrogenase）酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定技術(shù)，在生命科學(xué)研究、醫(yī)學(xué)診斷以及環(huán)境監(jiān)測(cè)等諸多領(lǐng)域發(fā)揮著關(guān)鍵作用。
琥珀酸脫氫酶是一種廣泛存在于真核生物線粒體和原核生物細(xì)胞膜上的關(guān)鍵酶，它參與細(xì)胞呼吸鏈中的三羧酸循環(huán)（TCA 循環(huán)）以及電子傳遞鏈過(guò)程，對(duì)細(xì)胞能量代謝至關(guān)重要。通過(guò)檢測(cè) SDH 的活性或含量變化，能有效反映細(xì)胞的代謝狀態(tài)、線粒體功能以及生物體的生理和病理狀況。
SDH ELISA 試劑盒通常基于雙抗體夾心法原理設(shè)計(jì)。試劑盒主要包含已包被抗 SDH 抗體的微孔板，用于捕獲樣本中的 SDH；一系列不同濃度梯度的 SDH 標(biāo)準(zhǔn)品，用于構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線，以實(shí)現(xiàn)對(duì)樣本中 SDH 的準(zhǔn)確定量；酶標(biāo)抗 SDH 抗體，可與已結(jié)合在固相抗體上的 SDH 形成夾心結(jié)構(gòu)；顯色劑，常見(jiàn)的如四甲基聯(lián)苯胺（TMB），在酶的催化下會(huì)發(fā)生顯色反應(yīng)；終止液，用于停止顯色反應(yīng)；以及各類(lèi)緩沖液，維持整個(gè)檢測(cè)過(guò)程的適宜反應(yīng)環(huán)境。
在實(shí)際檢測(cè)操作過(guò)程中，首先將經(jīng)過(guò)預(yù)處理的待測(cè)樣本（可能來(lái)自細(xì)胞裂解液、組織勻漿、血清等）以及 SDH 標(biāo)準(zhǔn)品加入到包被有抗 SDH 抗體的微孔板孔中。樣本中的 SDH 若存在，會(huì)與固相化在微孔板表面的抗體特異性結(jié)合。隨后加入酶標(biāo)抗 SDH 抗體，其與已結(jié)合的 SDH 進(jìn)一步結(jié)合，從而形成 “固相抗體 - SDH - 酶標(biāo)抗體" 的夾心免疫復(fù)合物。接著，使用洗滌緩沖液對(duì)微孔板進(jìn)行多次洗滌，徹di去除未結(jié)合的物質(zhì)，減少非特異性反應(yīng)，提高檢測(cè)準(zhǔn)確性。之后加入顯色劑 TMB，在酶標(biāo)抗體中酶的作用下，TMB 發(fā)生顯色反應(yīng)，顏色會(huì)隨著反應(yīng)時(shí)間逐漸加深，且顏色深淺與樣本中 SDH 的含量呈正相關(guān)。當(dāng)顯色達(dá)到合適程度時(shí)，加入終止液終止反應(yīng)，溶液顏色會(huì)發(fā)生明顯變化（如從藍(lán)色變?yōu)辄S色）。最后，利用酶標(biāo)儀在特定波長(zhǎng)（一般為 450nm）下測(cè)定各孔的吸光度（OD 值）。將樣本的 OD 值與預(yù)先繪制好的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對(duì)比，就能精確計(jì)算出樣本中 SDH 的含量。
SDH ELISA 檢測(cè)技術(shù)具有靈敏度高的特點(diǎn)，能夠檢測(cè)出極微量的 SDH，即便在樣本中 SDH 含量極低時(shí)也能準(zhǔn)確檢出。其特異性強(qiáng)，可有效識(shí)別和區(qū)分 SDH 與其他類(lèi)似物質(zhì)，降低誤檢概率。該技術(shù)重復(fù)性良好，不同批次檢測(cè)結(jié)果一致性高，為科研人員深入研究細(xì)胞代謝機(jī)制、疾病發(fā)病機(jī)理以及環(huán)境污染物對(duì)生物體代謝影響等提供了可靠的數(shù)據(jù)支持。在醫(yī)學(xué)研究中，可用于研究線粒體相關(guān)疾病，如線粒體腦肌病，通過(guò)檢測(cè)患者組織或細(xì)胞中的 SDH 含量變化，輔助疾病診斷和病情評(píng)估；在環(huán)境科學(xué)領(lǐng)域，可用于監(jiān)測(cè)污染物對(duì)生物體內(nèi)能量代謝的影響，評(píng)估環(huán)境質(zhì)量變化對(duì)生物生存狀態(tài)的作用。
