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支原體的檢測(cè)方法之qPCR法

閱讀:1529      發(fā)布時(shí)間:2022-3-24
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在實(shí)驗(yàn)室的工作中,支原體污染會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果,使生物制藥工業(yè)產(chǎn)品的合格率下降。故對(duì)其的檢測(cè)非常重要。支原體的檢測(cè)方法有很多,培養(yǎng)法、DNA染色法、ELISA法,qPCR法等等。但是我們今天我們重點(diǎn)講一講qPCR法。


qPCR,顧名思義,就是在PCR的基礎(chǔ)上加入熒光基團(tuán),通過(guò)熒光信號(hào)的變化的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR的反應(yīng)過(guò)程,最后通過(guò)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

熒光定量PCR法的出現(xiàn),極大地簡(jiǎn)化了定量檢測(cè)的過(guò)程。它具有以下幾大特點(diǎn):

1.時(shí)間短,2-3小時(shí)即可出結(jié)果;

2.靈敏度高、特異性強(qiáng);

3.檢測(cè)結(jié)果可定量;

4.操作簡(jiǎn)便,一臺(tái)機(jī)器即可

在和被喻為“金標(biāo)準(zhǔn)"的培養(yǎng)法的比較中。qPCR法檢測(cè)的時(shí)間短,只需兩個(gè)半小時(shí)左右即可出其結(jié)果;培養(yǎng)法在分離培養(yǎng)中,雖然是支原體檢測(cè)的“金標(biāo)準(zhǔn)",但是在支原體分離培養(yǎng)的過(guò)程中,要長(zhǎng)出明顯克隆需要7-29天,時(shí)間長(zhǎng)而且操作較為復(fù)雜,沒(méi)有辦法滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)的需求。

在此特別為大家推薦德國(guó)MB公司生產(chǎn)的支原體qPCR檢測(cè)試劑盒,它具有高特異性,一次檢測(cè)即可涵蓋了所有可能感染細(xì)胞的支原體物種,操作簡(jiǎn)單,易于觀察,而且具有高靈敏度,最高檢測(cè)可達(dá)到≤10CFU/ml。


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