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真核細(xì)胞重組蛋白表達(dá)及純化服務(wù)各種蛋白的純化技巧
真核細(xì)胞重組蛋白表達(dá)及純化服務(wù)各種蛋白的純化技巧:天然大分子蛋白分離純化:結(jié)合待分離的蛋白理化性質(zhì),適當(dāng)選用適合孔徑的分子篩截留分離純化,配合陰離子柱或陽離子柱,使用HLPC分離設(shè)備,收取洗脫峰,可以獲得純度95%以上的天然蛋白。天然小肽分離純化:通過分子篩初步截留大分子蛋白,使用大孔樹脂或反向樹脂純化小分子化合物,進(jìn)一步通過HPLC和MS對小肽分子鑒定,由于小肽分子一般含量較低,獲得的蛋白量較少。未知蛋白混合物分離純化:客戶需告知帶分離蛋白的基本特性,由鐘鼎分離純化,最終通過質(zhì)譜鑒定,活性鑒定 -
哺乳動物瞬時表達(dá)受體細(xì)胞應(yīng)具備的條件
哺乳動物瞬時表達(dá)廣泛地應(yīng)用于基因產(chǎn)物的快速表達(dá)及蛋白質(zhì)的小規(guī)模制備等方面。細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染表達(dá)能夠快速靈活的制備重組蛋白,細(xì)胞在轉(zhuǎn)染后合適時機(jī)即能可收獲并進(jìn)行分析.在瞬時轉(zhuǎn)染中,重組DNA導(dǎo)入感染性強(qiáng)的細(xì)胞系以獲得目的基因暫時高水平的表達(dá)。轉(zhuǎn)染的DNA不必整合進(jìn)宿主染色體,當(dāng)有大量樣品需要在短時間內(nèi)分析時,尤其是在轉(zhuǎn)染后1到4天內(nèi)收獲細(xì)胞,所得溶解產(chǎn)物用于檢測目的基因的表達(dá)時,可以采用瞬時轉(zhuǎn)染的方式。哺乳動物瞬時表達(dá)適用于生成具有天然結(jié)構(gòu)和活性的哺乳動物蛋白的選用表達(dá)平臺,可以實(shí)現(xiàn)高水平的翻譯后加工 -
*|重組蛋白大腸桿菌原核表達(dá)培養(yǎng),也可以這么簡單、高效!
大腸桿菌高效表達(dá)全線產(chǎn)品買贈活動買2瓶500mL賽多培™大腸桿菌表達(dá)培養(yǎng)基,送1瓶500mL大腸桿菌專用破菌液+1支25KU超級核酸酶;活動日期:即日起至2022.06.30對于進(jìn)行重組蛋白原核表達(dá)方面研究的小伙伴們,總會遇到各種各樣的問題,比如IPTG誘導(dǎo)劑的添加量、誘導(dǎo)時間、收集到的菌量少或者蛋白表達(dá)量少、如何破菌收集蛋白,如何去除核酸殘留等等,賽爾瑞成在大腸桿菌原核表達(dá)方向積累了豐富的經(jīng)驗(yàn),可以提供一整套大腸桿菌原核表達(dá)的解決方案,讓大腸桿菌重組蛋白表達(dá)更簡單、更高效!可見下圖賽爾瑞成大腸 -
新品|大腸桿菌表達(dá)培養(yǎng)基+大腸桿菌專用破菌液,讓蛋白表達(dá)更簡單!
賽多培TM大腸桿菌表達(dá)培養(yǎng)基CesuperTME.coliExpressionMedium產(chǎn)品簡介賽多培TM大腸桿菌表達(dá)培養(yǎng)基是賽爾瑞成研發(fā)的一種適合于大腸桿菌生長和蛋白表達(dá)的即用型全成分培養(yǎng)基。使用該培養(yǎng)基,只需一步操作,無需添加IPTG誘導(dǎo)劑,即可收獲含表達(dá)蛋白的菌體,與常規(guī)方法相比,對絕大多數(shù)蛋白表達(dá),其菌體生物量和對應(yīng)的目的蛋白都明顯提高數(shù)倍以上。產(chǎn)品優(yōu)勢1.操作簡單,提高效率直接挑取單菌落或用甘油菌接種,一步操作,然后培養(yǎng)過夜或培養(yǎng)至平臺期收菌,中間不用監(jiān)測生長狀態(tài)(監(jiān)測OD值),不用 -
重組人TSLP實(shí)驗(yàn)原理:用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗TSLP抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗TSLP抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的TSLP呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。重組人TSLP試驗(yàn)操作流程:實(shí)驗(yàn)前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度
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蛋白標(biāo)簽(proteintag)是指與目的蛋白一起融合表達(dá)的一段多肽(包括小肽)或者蛋白,其作用是便于目的蛋白的表達(dá)、純化、檢測和示蹤等。過去數(shù)十年,研究人員相繼發(fā)現(xiàn)和開發(fā)出了具有各種不同功能的蛋白標(biāo)簽,已在基礎(chǔ)研究和產(chǎn)業(yè)化產(chǎn)品生產(chǎn)等方面得到了廣泛的應(yīng)用。實(shí)際上,任何一個蛋白或多肽只要其具有促進(jìn)表達(dá)、便于純化或檢測等功能,都可以成為另一個蛋白或多肽的標(biāo)簽(或標(biāo)簽蛋白)。所以文獻(xiàn)報(bào)道可以當(dāng)做標(biāo)簽使用的蛋白或多肽超過數(shù)百種之多。但是,根據(jù)使用的廣泛程度和通用性衡量,常用的蛋白標(biāo)簽并不多。如上文所述,
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重組蛋白真核表達(dá)系統(tǒng)對蛋白質(zhì)表達(dá)有決定性影響的因素是什么?
重組蛋白真核表達(dá)包括酵母表達(dá)系統(tǒng)、桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)、腺病毒表達(dá)系統(tǒng)等。一般能正確折疊,含有各種修飾。但價(jià)格高,周期長?;虮磉_(dá)是指細(xì)胞把儲存在DNA序列中遺傳信息經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯,最終轉(zhuǎn)變成具有生物活性的蛋白質(zhì)分子。重組蛋白的應(yīng)用用于結(jié)構(gòu)研究時,重組蛋白的表達(dá)要求正確的蛋白質(zhì)折疊、形成正確的二硫鍵、均一的重組產(chǎn)物。每種表達(dá)系統(tǒng)的蛋白質(zhì)折疊和二硫鍵形成的內(nèi)在能力。不均一性的潛在來源包括鱗酸化、甲硫氣酸氣膚酶對起始甲硫氨酸的低效切割以及糖基化。不幸的是,不均一的磷酸化常見于重組蛋白激酶的表達(dá) -
重組人GDF3試劑盒具有的三種特性:靈敏度:最小的GDF-3檢測濃度小于30pg/ml。特異性:可同時檢測重組或天然的人GDF-3。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。重組人GDF3其要求有哪些:1.生物活性:進(jìn)行相應(yīng)的體外或體內(nèi)活性檢測。2.純度:應(yīng)用兩種方法分析產(chǎn)品純度。3.真實(shí)性:重組蛋白產(chǎn)品一致經(jīng)過N末端氨基酸序列分析;必要時應(yīng)用SDS-PAGE,RP-HPLC和質(zhì)譜(MS)檢測其真實(shí)性。4.內(nèi)毒素:kineticLAL法檢測內(nèi)毒素。5.蛋白含量:通過紫