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杭州聚同電子有限公司

脂肪測定儀之索氏提取法實驗過程介紹

時間:2020-2-21閱讀:2152

索氏提取法對包含在組織內(nèi)部的脂肪等不能*提取出來,酸分解法常使磷脂分接而損失。而在一定的水分存在下,極性的甲醇及非極性的*混合溶液卻能有效地提取結(jié)合態(tài)脂類,如脂蛋白、蛋白脂等及磷脂,此法對于高水分生物試樣如鮮魚、蛋類等脂類的測定更為有效。

 (1)原理

    *-甲醇提取法的原理是將試樣分散于*-甲醇混合液中,于水浴上輕微沸騰,-甲醇混合液與一定的水分形成提取脂類的有效溶劑,在使試樣組織中結(jié)合態(tài)脂類游離出來的同時與磷脂等極性脂類的親合性增大,從而有效地提取出全部脂類。再經(jīng)過濾,除去非脂成分,然后回收溶劑,對于殘留脂類要用石油醚提取,定量。

  • 儀器

具塞三角瓶

    電熱恒溫水浴:50~100

    提取裝置

   布氏漏斗

   具塞離心管

   離心機:3000r/min

(3)試劑

    *:97%(體積分數(shù))以上。

    甲醇:96%(體積分數(shù))以上。

      *甲醇混合液:按2:1體積比混合。

     石油醚。

     無水硫酸鈉:以120~135干燥1~2h。  

(4)操作步驟

   提取  

    準(zhǔn)確稱取均勻樣品5g于具塞三角瓶內(nèi)(高水分食品可加適量硅藻土使其分散),加入60mL*-甲醇混合液(對于干燥食品,可加入2~3mL水)。連接提取裝置,于650C水浴中,由輕微沸騰開始,加熱1h進行提取。

   回收溶劑

    提取結(jié)束后,取下燒瓶用布氏漏斗過濾,并用*-甲醇混合液洗滌濾器,燒瓶及濾器中試樣殘渣,濾液、洗滌液一并收集于具塞三角瓶內(nèi),置65~700C水浴中回收溶劑,至燒瓶內(nèi)物料呈濃稠態(tài),而不能使其干,然后冷卻。

  石油醚萃取、定量

用移液管加入25ml石油醚,然后加入15g無水硫酸鈉,立即加塞混搖1 min ,將醚層移入具塞離心沉淀管進行離心分離(3000r/min)5min.用10mL移液管加入迅速吸取離心管中澄清的石油醚10mL,于已稱量至恒量的干燥稱量瓶內(nèi),蒸發(fā)去除石油醚,于100~105烘箱中烘至恒量(約30 min )。

(5)結(jié)果計算

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