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實驗儀器
超凈工作臺、CO2培養(yǎng)箱、生物倒置顯微鏡、6孔板(其他的也可以,但感覺6孔比較好,大小適中)、marker筆、直尺20、微升槍頭(滅菌)、無血清培養(yǎng)基、PBS
細胞劃痕檢測實驗準備
所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min (超凈臺內)
實驗流程
1.先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻得劃橫線,大約每隔0.5~1cm- -道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。
2.在空中加入約5X105個細胞,具體數量因細胞不同而不同,掌握為過夜能鋪滿。
3.第二天用槍頭比著直尺,盡量垂至于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不能傾斜。
4.用PBS洗細胞3次,去處劃下的細胞,加入無血清培養(yǎng)基。
5.放入37度5%CO2培養(yǎng)箱,培養(yǎng)。按0, 6, 12, 24小時取樣,拍照。
細胞劃痕檢測實驗服務內容與方法
1、使用marker筆在6孔板背后,均勻得劃橫線,大約每隔0.5-1cm-道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。
2、在孔中加入約5*105個細胞,具體數量因細胞不同而不同,掌握為過夜能鋪滿。
3、第二天用槍頭比著直尺,盡量垂至于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不能傾斜。
4、用PBS洗細胞3次,去除劃下的細胞,加入無血清培養(yǎng)基。
5、放入37度5%co2培養(yǎng)箱,培養(yǎng)。按0, 6, 12, 24小時取樣,拍照。
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