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中級(jí)會(huì)員 | 第6年

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水質(zhì)檢測儀器
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紫外分光光度計(jì)如何選擇合適的波長進(jìn)行測量?

時(shí)間:2024/8/9閱讀:1866
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選擇紫外分光光度計(jì)合適的測量波長,主要考慮以下幾個(gè)方面:


  1. 物質(zhì)的特征吸收峰
    • 查閱相關(guān)的化學(xué)和生物學(xué)文獻(xiàn),了解待測物質(zhì)在紫外-可見光區(qū)域的特征吸收波長。

    • 許多物質(zhì)在特定波長下具有最大吸收,選擇該波長能獲準(zhǔn)確的測量結(jié)果。例如,DNA 在 260nm 處有明顯的吸收峰。

      1.jpg

  2. 避免干擾
    • 考慮樣品中可能存在的其他物質(zhì)的吸收情況,選擇波長時(shí)要盡量避開這些干擾物質(zhì)的吸收峰,以確保測量的準(zhǔn)確性。

    • 比如在復(fù)雜的混合物中,如果兩種成分的吸收峰較為接近,應(yīng)選擇吸收差異較大的波長進(jìn)行測量。

  3. 實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮头椒ㄒ?/div>
    • 遵循特定實(shí)驗(yàn)方法或標(biāo)準(zhǔn)操作流程中推薦的測量波長。

    • 如果是為了與已有的研究結(jié)果進(jìn)行比較,應(yīng)采用相同的波長。

  4. 波長掃描
    • 對(duì)于不明確吸收波長的物質(zhì),可以先進(jìn)行波長掃描。

    • 即讓儀器在一定波長范圍內(nèi)連續(xù)測量吸光度,從而確定待測物質(zhì)的最佳吸收波長。

  5. 儀器性能
    • 考慮所使用的紫外分光光度計(jì)在不同波長下的性能,如靈敏度、穩(wěn)定性和噪聲水平。

    • 某些儀器在特定波長范圍內(nèi)可能具有更好的測量精度。

      5.jpg


例如,在測定維生素 C 含量時(shí),通常選擇 245nm 作為測量波長,因?yàn)榫S生素 C 在這個(gè)波長處有較強(qiáng)的特征吸收,且能有效避免其他常見物質(zhì)的干擾。


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