HB101 化轉克隆感受態(tài)HB101 菌株是 E. coli K-12 菌株和 E. coli B 菌株的雜合產物（同時也是 Stbl3 的原始菌株）。該菌株
攜帶 recA13 突變，可有效抑制長片段末端重復區(qū)的重組，降低錯誤重組的概率；但由于其不含核
酸酶 endA1 突變，體內核酸酶含量較高，提取質粒時務必使用質粒提取試劑盒中的去蛋白液以去除
核酸酶。

產品簡介

HB101 化轉克隆感受態(tài)

HB101 菌株是 E. coli K-12 菌株和 E. coli B 菌株的雜合產物（同時也是 Stbl3 的原始菌株）。該菌株

攜帶 recA13 突變，可有效抑制長片段末端重復區(qū)的重組，降低錯誤重組的概率；但由于其不含核

酸酶 endA1 突變，體內核酸酶含量較高，提取質粒時務必使用質粒提取試劑盒中的去蛋白液以去除

核酸酶。hsdS20 背景使 HB101 缺失內切酶系統(tǒng)，增強了外源 DNA 的穩(wěn)定性和提取質量；此菌株具

有鏈霉素抗性；不存在 lacIqZΔM15，不可用于藍、白斑篩選。經 pUC18 質粒轉化檢測，HB101 感

受態(tài)細胞的轉化效率可達 107 cfu/μg DNA。

產品組成

HB101 化轉克隆感受態(tài)

組分 CC96174-01 CC96174-02 CC96174-03

HB101

化學感受態(tài)細胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：F- mcrB mrr hsdS20 (rB- mB- ) recA13 leuB6 ara-14 proA2 lacY1 galK2 xyl-5 mtl-1 rpsL20 (StrR) glnV44 λ-

存儲條件

-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

HB101 化轉克隆感受態(tài)

質量控制

無外源質粒 DNA 殘留；

化學法轉化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰浴中靜置 2-3 min；

4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預熱），后置于 37 ℃搖床復壯 45 min；

5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。

注意事項

1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應立即使用；

2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；

3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞，僅用手指輕彈即可；

4. 為確保.高轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。