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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品簡介
Shuffle T7 Express lysY 來源于大腸桿菌 B 菌株，在染色體上組成型表達(dá)二硫鍵異構(gòu)酶 DsbC，該酶
可幫助二硫鍵錯(cuò)誤折疊的蛋白形成正確的構(gòu)型，從而促進(jìn)胞質(zhì)中的含二硫鍵蛋白的高效表達(dá)；同
時(shí)，該菌株也適合表達(dá)毒性蛋白。此外，Shuffle T7 Express 有 Cam、Nit、Spec 和低濃度 Str 的抗
性，也可抵抗噬菌體 T1(fhuA2)噬菌體的侵染。經(jīng) pUC18 轉(zhuǎn)化檢測，Shuffle T7 Express lysY 感受態(tài)
細(xì)胞的效率可達(dá) 108 cfu/μg DNA 以上。
產(chǎn)品組成
組分 CC96161-01 CC96161-02 CC96161-03
Shuffle T7 Express lysY
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：MiniF lysY (CamR)/fhuA2 lacZ::T7 gene1 [lon] ompT ahpC gal λatt::pNEB3-r1-cDsbC (SpecR, lacIq) ΔtrxB sulA11
R(mcr-73::miniTn10--TetS )2 [dcm] R(zgb-210::Tn10 --TetS) endA1 Δgor ?(mcrC-mrr)114::IS10
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存；請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動(dòng)，熱激 90s 后，立刻置于冰浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用；
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率，整個(gè)操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
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