化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
產(chǎn)品簡介
該菌株屬于 Novablue 衍生菌株，具有很高的質粒轉化效率，也可同時表達多種稀有密碼子 tRNA，
可用于真核蛋白的表達。該菌株沒有整合 λ 噬菌體的 DE3 區(qū)，因此該菌株自身不能表達 T7 RNA 聚
合酶，也不能用于 T7 啟動子驅動的蛋白誘導表達。Rosetta Blue 感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，
pUC18 質粒檢測轉化效率>108 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
Rosetta Blue 感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：endA1 hsdR17 (rK– mK+) supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac F' [proA+B+ lacIqZ?M15::Tn10]
pRARE2 (CamR , TetR)
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
除 pRARE2 外，無外源質粒 DNA 殘留；
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預熱），然后置于 37 ℃搖床復壯 45 min；
5. 取不同體積的轉化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰水浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；
3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保優(yōu)良轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
化工儀器網(wǎng)