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檢測原理：試劑盒采用一步間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被免疫缺陷病毒抗原的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測抗抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值），與CUTOFF值相比較，從而判定標(biāo)本中抗免疫缺陷病毒抗體（HIV Ab）的存在與否。

上海軒澤康生物96T試劑盒人免疫缺陷病毒抗體(HIV-Ab)ELISA試劑盒組成及其配置：

①微孔酶標(biāo)板（ 12 孔×8 條）；

②陰性對照 0.5mL；

③陽性對照 0.5mL；

④檢測抗原-HRP 10mL；

⑤20×洗滌緩沖液 25mL；

⑥稀釋液 6mL；

⑦底物 A 6mL；

⑧底物 B 6mL；

⑨終止液 6mL；

⑩封板膜 2 張；說明書 1 份；自封袋 1 個.

備注：20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按 1：20 稀釋，即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。

實(shí)驗(yàn)所需自備試驗(yàn)器材：

1. 酶標(biāo)儀（450nm）

2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

4. 蒸餾水或去離子水

人免疫缺陷病毒抗體(HIV-Ab)ELISA試劑盒常見問題解答：

1.   問：如何選擇合適的陽性對照？

上海軒澤物解答：陽性對照的基本組成應(yīng)該盡量與檢測樣本的組成一致，一般陽性對照多以含蛋白保護(hù)劑的緩沖液為基質(zhì)，加入一定量的待檢物質(zhì)。比如：以人血清為標(biāo)本的測定，陽性對照多用確定的病人血清或者以覆蓋人血漿為原料加入一定量標(biāo)準(zhǔn)品。

2. 問：我能否在實(shí)驗(yàn)開始前*收集樣品？

上海軒澤物解答：可以。如若收集的樣本不能及時進(jìn)行檢測，請保存至-20℃或按照說明書進(jìn)行保存。應(yīng)避免反復(fù)凍融。

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