諾博萊德植物中酰脲含量檢測試劑盒 Plant Ureides Content Assay Kit

植物中酰脲含量檢測試劑盒 氮素

產(chǎn)品貨號：BC2153

產(chǎn)品名稱：植物中酰脲含量檢測試劑盒 Plant Ureides Content Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格：100T/48S

產(chǎn)品簡介：

自備試劑：該試劑盒實驗過程中需自備試劑，詳情見網(wǎng)站說明書

中文名稱：植物中酰脲含量檢測試劑盒

英文名稱：Plant Ureides Content Assay Kit

規(guī)格：100T/48S

檢測方法：微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

儲存條件：Store at -20℃，6 months

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder BC2153植物中酰脲含量檢測試劑盒 Plant Ureides Content Assay Kit

4、標(biāo)準(zhǔn)品:10mg尿囊su。臨用前加入632.5μL蒸餾水配制成100μmol/mL酰脲標(biāo)準(zhǔn)液。

產(chǎn)品說明:

選育高固氮活性豆科植物品種是提高豆科植物固氮能力的一個有效途徑。大豆根瘤菌固氮的最初輸出產(chǎn)物主要是酰脲(尿囊su和尿囊酸)。酰脲是大豆一根瘤菌共生固氮中的氮代謝產(chǎn)物，是氮素貯藏和運輸?shù)闹饕问?，在大豆氮代謝中起著重要作用?？赏ㄟ^測定豆科植物組織中酰脲的含量，從而評估其固氮能力。

尿囊su在過酸或堿條件下水解產(chǎn)生乙醛酸，然后在苯肼和強(qiáng)酸條件下可被氧化，生成紅色絡(luò)合物，在535nm處有特殊吸收峰，據(jù)此可由吸光值計算出樣本中酰脲的含量。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、鼓風(fēng)烘箱、微量玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽、30~50目篩、冰和蒸餾水、無水乙醇(>98%，AR)、濃鹽酸(37%，AR)和EP管。

操作步驟

一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量）

植物樣本：將供試的植物樣本在65℃的鼓風(fēng)烘箱中烘干，研磨成粉狀，過30~50目篩。按質(zhì)量(g):提取液體積(mL)1:10~20比例(建議稱取0.1g烘干樣本，依次加入1.0mL提取液A與1.0mL提取液B，禁止將提取液 A與提取液B混勻待用)，漩渦混勻，在80℃水浴鍋中萃取5min，然后3500rpm，室溫，離心15min，棄沉淀，取上清液置于冰上待測。

二、測定步驟

1、分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至535nm，蒸餾水調(diào)零。

2、將試劑六與試劑七置于冰水浴中預(yù)冷30min以上，并置于冰上待用。

3、標(biāo)準(zhǔn)液的處理:將標(biāo)準(zhǔn)品配制成100μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液后，用蒸餾水稀釋至25、12.5、6.25、3.125、1.5625、0.78125 nmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。(備注：注意不要在此步驟直接檢測吸光值)

注意:對照管不進(jìn)行水浴加熱處理;尿囊酸測定管只需進(jìn)行第二次的沸水浴;測定管、標(biāo)準(zhǔn)管及空白管在沸

水浴加熱時，EP管蓋緊并用封口膜密封，避免液體蒸發(fā)影響試驗數(shù)據(jù)。

三、植物中酰脲含量計算

1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:

以各個標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為x軸，其對應(yīng)的△A標(biāo)準(zhǔn)為y軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)方程y-kx+b，將△A尿囊酸和△A酰脲分別帶入方程得到x:(nmol/mL)和x>(nmol/mL)。

2、豆科植物中酰脲含量的計算:

尿囊酸含量(nmolg質(zhì)量)=x?xV提取+W=2xx?÷WJFE SCIE

酰脲含量(nmol/g質(zhì)量)=x2xV 提取÷W=2xx2+W

V提取:加入提取液體積，2mL:W:樣本質(zhì)量，g。

植物中酰脲含量檢測試劑盒 氮素

產(chǎn)品訂購信息：

BC2153植物中酰脲含量檢測試劑盒 Plant Ureides Content Assay Kit 100T/48S