小鼠堿性磷酸酶(ALP)elisa試劑盒準(zhǔn)備試劑與收集血樣：
1. 收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃ ）保存，避免反復(fù)凍融。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成1200ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul 。在管中加入1200ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。
3. 10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1：10倍稀釋（示例：1ml濃稀液+9ml蒸餾水）。
4. 洗滌液：用重蒸水1：20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）。

實驗流程:
1. 產(chǎn)品僅用于科研實驗前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100µL，37°C孵育1小時；
3. 吸棄，加檢測溶液A100µL，37°C孵育1小時；
4. 洗板3次；
5. 加檢測溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數(shù)。
檢測程序：
1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。
注意事項:
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10．如與英文說明書有異，產(chǎn)品僅用于科研以英文說明書為準(zhǔn)。
注：本公司提供試劑盒免費代測服務(wù)。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員。