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　　以下是天津本生熒光定量PCR板的使用要點(diǎn)及注意事項(xiàng)：

　　一、核心使用規(guī)范

　　板型選擇?

　　優(yōu)先選用原廠配套板(如Roche LightCycler 96孔板)或兼容品牌(如Bio-Rad白色矮管)

　　96孔板標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)體積為20-100μL，需確?？装宀馁|(zhì)為光學(xué)級(jí)透明聚丙烯

　　加樣操作?

　　使用低吸附槍頭分裝反應(yīng)液，避免氣泡產(chǎn)生(氣泡會(huì)干擾熒光檢測(cè))

　　推薦預(yù)混反應(yīng)體系后再分裝至各孔，減少孔間誤差

　　二、實(shí)驗(yàn)流程控制

　　封板要求?

　　必須使用光學(xué)透明封板膜，裸手或粉末手套接觸會(huì)污染光學(xué)表面

　　封板后需離心(1000×g，1分鐘)使液體沉底并消除氣泡

　　程序設(shè)置?

　　基線循環(huán)數(shù)建議設(shè)為3-15循環(huán)(由儀器自動(dòng)計(jì)算熒光背景值)

　　閾值設(shè)定通常為基線熒光標(biāo)準(zhǔn)差10倍，可手動(dòng)調(diào)整至指數(shù)擴(kuò)增期

　　三、質(zhì)量控制要點(diǎn)

　　對(duì)照設(shè)置?

　　必須包含無(wú)模板對(duì)照(NTC)監(jiān)控污染

　　建議添加內(nèi)參基因孔用于數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化

　　性能驗(yàn)證?

　　標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率應(yīng)在-3.1至-3.6之間(對(duì)應(yīng)90-110%擴(kuò)增效率)

　　復(fù)孔CV值需<5%，否則需排查加樣誤差或試劑不均問(wèn)題

　　四、特殊場(chǎng)景處理

　　高通量檢測(cè)?

　　384孔板需配合自動(dòng)化液體處理系統(tǒng)，減少人工操作誤差

　　多色熒光檢測(cè)時(shí)需設(shè)置光譜校準(zhǔn)孔消除通道間串?dāng)_

　　數(shù)據(jù)保存?

　　實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)建議實(shí)時(shí)導(dǎo)出至U盤(需格式化后使用)

　　原始數(shù)據(jù)應(yīng)包含擴(kuò)增曲線、熔解曲線及Ct值表格

　　注：不同儀器型號(hào)可能存在具體操作差異，需參照設(shè)備手冊(cè)，以上資料僅供參考，具體請(qǐng)咨詢技術(shù)老師。

　　天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來(lái)。